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黄曲霉毒素属于真菌毒素，是由曲霉属中的寄生曲霉和黄曲霉产生的一类结构相似的次级代谢产物，粮食和食品中的主要存在形式是黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1及M2，其中黄曲霉毒素B1(AFB1)的毒性和致癌性最强，可以引起人类的慢性中毒，损害机体的多个脏器，生殖紊乱和免疫抑制等，特别是肝脏损害以及肝癌。很多国家都为本国的食品、饲料等制定了AFB1的限量标准。因此，简便高效的样品净化前处理方法和灵敏特异的检测技术对维护食品安全具有重要意义。 免疫亲和柱法作为一种样品富集和净化的前处理方法，因其高特异性、高灵敏度及净化效果好等优势，逐步用于真菌毒素净化和富集。与仪器分析法相比，酶联免疫吸附法(ELISA)具有特异性高、重复性较好、操作简单、成本较低等优点。将ELISA与免疫亲和柱纯化和富集方法相结合，可以提高检测灵敏度。本研究的目的是:(1)建立AFB1的免疫亲和层析柱;(2)优化该亲和层析柱的使用条件;(3)与ELISA方法相结合的检测饲料样品中AFB1的适用性。 研究结果表明:(1)用高纯度的AFB1单克隆抗体和溴化氰活化的Sepharose4B进行偶联、装柱，偶联率为98％，柱容量为646ng。(2)免疫亲和柱可以多次使用，但是免疫亲和柱的富集效果会有所下降:7次重复使用后可从85％下降到73％。故优化柱子的再生方法，分别用高pH与低pH的缓冲液交替洗涤，经过再生后的柱子对AFB1的富集率可高达93.7％。(4)食品或饲料样品需用pH中性、低浓度有机溶剂或盐溶液进行萃取，强有机溶剂或强酸或强碱会影响抗体活性，进而降低富集效率和亲和柱的使用次数。(5) AFB1单克隆抗体免疫亲和柱的富集条件:上样缓冲液流速为3ml/min，缓冲液中甲醇浓度为40％;洗脱液含30％甲醇-1M NaCl(pH=2.1)，150ng标准品对应8ml洗脱液体积。经加标回收率实验计算得到平均回收率为88.1％，变异系数0.62～2.37％。(6)免疫亲和柱在4℃放置70天的样品回收效率为80％。(7)用HPLC方法和免疫亲和-ELISA联用的方法分别对30份饲料样品进行检测，经统计学分析两种方法检测的结果无显著性差异(P＞0.05)。上述结果初步表明本试验研制的免疫亲和柱结合间接竞争ELISA方法可用于实际样品的批量检测。