肉桂总黄酮提取分离分析及抗氧化活性研究

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本论文以肉桂和提取桂油后的肉桂渣为原料,以总黄酮为研究对象,开展了肉桂总黄酮提取、分离纯化、分析方法及抗氧化活性研究,研究结果为肉桂综合利用与深入开发提供了一定的理论基础。(1)采用颜色反应、薄层层析、紫外可见光谱、高效液相色谱、红外光谱等手段定性分析了肉桂总黄酮;以NaNO2-Al(NO3)3-NaOH为显色剂,芦丁为标准样品,采用紫外可见分光光度法建立了肉桂总黄酮定量分析方法,该分析方法稳定性、精密度良好,平均加标回收率高。(2)采用溶剂浸提法和超声波辅助法对肉桂总黄酮进行提取研究,通过单因素和正交试验优化了总黄酮提取条件。结果表明:乙醇浸提法提取肉桂和肉桂渣总黄酮优化条件分别为:①乙醇浓度60%、料液比1:60(g·mL-11、提取时间6h、提取温度70℃;②提取温度80℃、提取时间4h、乙醇浓度50%、料液比1:40(g·mL-1)。在优化条件下,肉桂和肉桂渣总黄酮提取率分别达16.10%和3.80%。水浸提法提取肉桂和肉桂渣总黄酮优化条件分别为:①料液比1:50(g·mL-1)、提取时间1h、提取温度90℃;②料液比1:50(g·mL-1)、提取时间5h、提取温度90℃。在优化条件下,肉桂和肉桂渣总黄酮提取率分别达7.60%和1.51%。超声波辅助法提取肉桂渣总黄酮优化条件为:乙醇浓度50%、料液比1:50(g·mL-1)、提取时间30min、提取温度50℃,总黄酮提取率达3.56%。(3)利用大孔吸附树脂法对肉桂总黄酮进行分离纯化研究,考察影响树脂静态和动态吸附与洗脱主要因素,优化了肉桂总黄酮分离纯化条件。9种大孔吸附树脂静态吸附和解吸的实验结果表明,HPD-500型吸附和解吸效果较为理想,其静态吸附和解吸优化条件为:吸附平衡时间为6h,解吸平衡时间为3h,样液浓度为0.8mg-mL-1,样液pH值为6.0,吸附和解吸温度分别为30℃和60℃,洗脱液乙醇浓度为80%;树脂HPD-500动态吸附和洗脱优化条件为:上样液浓度为1.2mg·mL-1,上样液流速为1.5mL-min-1,洗脱液流速为2.0mL·min-1,洗脱液用量为150mL。在优化条件下,肉桂总黄酮分离纯化得到纯化品总黄酮含量达91.81%。(4)进行了肉桂总黄酮抗氧化活性研究,结果指出,在一定浓度范围内,浓度与清除率之间存在一定量效关系,清除率会随着浓度增加而逐渐升高。当浓度为2.0mg·mL-1时,肉桂总黄酮粗提品和纯化品对DPPH自由基清除率达94.29%和87.14%,肉桂渣达93.86%和90.27%;当浓度为4.5mg·mL-1时,肉桂总黄酮粗提品和纯化品对-OH自由基清除率达40.49%和37.74%,肉桂渣达36.02%和30.65%;当浓度为4.0mg-mL-’时,肉桂总黄酮粗提品和纯化品对02-·自由基清除率达23.46%和21.09%,肉桂渣达18.84%和16.84%。
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