论文部分内容阅读
我国拥有丰富的中草药资源，在中华民族发源的历史上，中草药发挥着重要的作用。现在，中草药依然发挥着功不可没的作用。由于中药成分复杂，有效成分含量低，难以纯化，而中药中高纯度活性成分是中药含量测定、药理研究、质量控制的标准物质，因此建立有效快捷的分离纯化中药有效活性成分的方法非常必要。本文通过对中草药化学成分分离纯化方法的研究，建立了罗布麻叶和续断中化学成分分离纯化的新方法。实验中运用高效液相色谱(HPLC)进行粗提物的检测和单体纯度的分析，并对检测条件进行优化；运用制备型高效液相色谱(PHPLC)和柱层析法对目标化合物进行分离纯化，同时对流动相的组成、流速和进样体积进行了优化；利用紫外光谱(UV)、核磁共振光谱(NMR)对各目标化合物的化学结构进行了鉴定。1、罗布麻叶中化合物分离纯化的研究建立了应用制备型高效液相色谱（PHPLC）技术分离纯化罗布麻叶中黄酮及其它类化合物的新方法。首先对罗布麻的提取物通过聚酰胺柱层析色谱法进行初步的分离纯化，将得到的不同段分别经PHPLC进行分离纯化。通过对PHPLC色谱条件优化，得到的最优色谱条件为：YMC ODS-A柱(400mm×40mm I.D.,10μm)，流动相为甲醇-水(18:82, v/v)，进样量为2mL，流速20mL/min，检测波长为360nm。从罗布麻叶中分离制备出白麻苷，黄芪苷，没食子儿茶素，芦丁，金丝桃苷，异槲皮素，山奈酚、异鼠李素、槲皮素9种单体，利用UV、NMR对其结构进行了鉴定。2、续断中环烯醚萜类化合物分离纯化的研究建立了应用PHPLC分离纯化续断中化学成分的方法。首先对续断中活性成分的提取工艺条件进行了研究，最佳的提取条件为：乙酸乙酯作为提取溶剂，加热回流提取3次（2h,2h,1h）。然后通过石油醚、乙酸乙酯萃取的方法对续断的粗提物进行初步的纯化分段，再经ODS反相柱层析法进一步纯化。优化的反相柱层析法色谱条件为：ODS柱(40cm×4cm,50μm)自装柱，流动相为乙腈-水梯度洗脱，进样量为30mL，流速为5.0mL/min，检测波长为210nm，柱温为室温。再经过PHPLC纯化，色谱条件为：YMC ODS柱(400mm×40mm I.D.,10μm)，流动相为乙腈-水(20:80, v/v)，进样量为2mL，流速为20mL/min，检测波长为210nm分离制备出Epi-vogeloside、vogeloside、β-甾谷醇5种活性成分，利用UV和NMR对其中3种成分进行了结构鉴定。