高脂饮食对AOM/DSS诱导的实验性结肠炎及结直肠癌小鼠模型的EGF和EGFR的影响

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目的:溃疡性结肠炎(UC)是一种病因不明的结直肠慢性非特异性炎症性疾病,一般认为其发病与自身免疫,遗传以及周围环境相关。研究表明,溃疡性结肠炎的患者的病程越长,恶变的几率越高。这一过程与血管内皮生长因子(VEGF),表皮细胞生长因子(EGF),表皮生长因子受体(EGFR)等诸多细胞因子相关,其中EGFR和EGF等肿瘤相关因子尤其备受瞩目。相关研究证实,高脂饮食是溃疡性结肠炎以及结直肠癌的风险因素,但是目前尚未有研究证实高脂饮食对溃疡性结肠炎患者的EGFR的表达是否会产生影响。因此,本研究希望通过利用氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠(AOM/DSS)诱导小鼠的实验性结肠炎以及结肠癌模型,并给予高脂饮食干预,检测EGFR及其EGF表达量的变化,进一步探讨高脂饮食对于溃疡性结肠炎以及结直肠癌的相关信号分子的影响,为溃疡性结肠炎的预防以及诊治提供相关的诊疗思路。材料和方法:本研究主要利用DSS与灭菌水,以7天为一循环周期,交替口服诱导小鼠UC模型。依据小鼠饮食,设置对照组(n=15),DSS+正常饮食组(n=15),DSS+AOM+正常饮食组(n=15),DSS+高脂饮食组(n=15)以及DSS+AOM+高脂饮食组(n=15)。将AOM依据小鼠体重计算用量(10mg/kg)后,将其于前三个循环周期的每周期第一天,向DSS+AOM组+正常饮食组以及DSS+AOM+高脂饮食组小鼠腹腔注入。随后分时段处死小鼠,依据其病理组织学评分等相关指标判断其炎症程度,并用S-P免疫组化法检测小鼠UC组织,结肠癌组织以及正常结肠组织中的EGFR和EGF的表达水平。结果:本研究结果表明单一使用DSS可诱导UC模型,第9周期末处死的小鼠中,对照组与DSS组未见不典型增生的发生,而DSS+高脂饮食组不典型增生或癌变率则为20.00%(1/5);DSS+AOM+正常饮食组则为80.00%(4/5);DSS+AOM+高脂饮食组的不典型增生和癌变率则高达100.00%(5/5)。EGF,EGFR在4个实验组中明显高表达,其阳性率明显高于正常结肠组织(P<0.05)。且DSS+高脂饮食组小鼠标本中EGF和EGFR表达明显高于DSS+正常饮食组(p<0.05)。但DSS+AOM+高脂饮食组小鼠对比DSS+AOM+正常饮食组小鼠中二者表达未见明显统计学差异(p>0.05)。同时,DSS+高脂饮食组和DSS+AOM+高脂饮食组组织的疾病活动指数、病理组织学评分均分别大于对应的未添加高脂饮食组的组织(p<0.05)。结论:在本文中,我们通过AOM/DSS成功诱导小鼠实验性结肠炎以及结肠癌模型,通过组织的疾病活动指数、病理组织学评分判断小鼠模型的炎症程度,并利用S-P免疫组化法检验组织中EGF和EGFR的表达量。证明了高脂饮食组小鼠病变肠道组织中EGF及EGFR的表达高于正常饮食组且具有统计学意义,随着肠道病变程度加重EGF及EGFR的表达也有所提高。我们的研究阐述了高脂饮食对UC的影响,简要验证了其可能影响的细胞因子,证明高脂饮食可能为促进UC病变及癌变的一个重要诱因。
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