新型抗病毒剂病毒星作用机理研究

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病毒星是本中心自主开发的具有高效抗TMV活性的抗病毒剂;为系统研究病毒星的作用机理,寻找病毒星抗TMV的作用靶标,本论文开展了如下工作:采用半叶枯斑法对病毒星室内生物活性测试发现:病毒星在500μg/mL剂量下的活体治疗抑制率为66.23%,明显优于宁南霉素(500μg/mL,45.56%),在离体治疗、活体钝化、活体保护条件下的抑制率分别达48.53%、68.85%、48.98%,其对TMV的EC50为294.47μg/mL,剂型优化试验表明30%病毒星可湿性粉剂对TMV的活体治疗效果明显优于对照药剂宁南霉素。抗TMV病田间药效试验:30%可湿性粉剂的病情指数均明显低于空白对照区(P<0.05),第二十一天的防治效果达61.19~76.08%。同时田间观察发现,喷施病毒星后,烟草叶片的颜色明显变绿。以上结果表明半叶法摩擦接种的室内活体治疗效果与田间试验药效具有一定可比性,这可能意味着病毒星在室内生测心叶烟与田间试验普通烟K326叶片中的作用机制具有类似性。开展了病毒星抗TMV生化机理初步研究:发现病毒星处理接种TMV后的烟草植株中,PAL活性、POD活性、SOD活性及叶绿素含量等相关酶和调控物质在一定的时间内都具有相关性。病毒星明显诱导了PAL活性的升高;同时也诱导了叶绿素含量的增加。考察了病毒星对烟草病程相关蛋白(PR)的诱导作用,结果显示:病毒星诱导烟叶中胞间蛋白的种类和TMV刺激烟叶产生的胞间蛋白的种类基本一致;且经等点聚焦电泳实验发现,三种蛋白中分子量为55KDa的蛋白可能是核酮糖1,5-二磷酸羧化酶的一个大亚基(分子量55KDa,等电点pH 4.9)。通过透射电镜进行病毒星钝化半小时后的病毒粒子和正常的病毒粒子形态比较,发现病毒星有使病毒粒子凝聚的倾向。
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