目的:观察荷叶碱(Nuciferin,NUF)对巨噬细胞泡沫化的影响并探讨其可能的分子机制。方法:1、体外培养人单核巨噬细胞细胞系THP-1,利用氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,OX-LDL)诱导建立泡沫细胞模型,同时用5、10和20μmol/L荷叶碱进行干预。2、采用油红O染色及总胆固醇含量测定评价其对泡沫细胞的影响3、检测荷叶碱对细胞自噬的影响:通过蛋白免疫印迹(western blot)检测LC3B、P62蛋白的表达,激光共聚焦显微镜检测自噬流,透射电镜(Transmission electron microscope,TEM)检测自噬小体数量。4、利用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)抑制细胞自噬,观察荷叶碱通过调控自噬对泡沫细胞形成的影响。5、通过蛋白免疫印迹(western blot)检测Akt、mTOR、pAkt、p-mTOR蛋白的表达,观察荷叶碱是否通过PI3K/Akt/mTOR通路发挥作用。结果:1、与对照组相比,OX-LDL模型组细胞内脂质沉积显著增加(P<0.05),总胆固醇含量显著增加(P<0.001),电镜下可见脂滴,提示泡沫细胞模型成功建立。2、与OX-LDL模型组相比,荷叶碱组细胞内脂质沉积显著减少(P<0.05),总胆固醇含量下降(P<0.05),提示荷叶碱可抑制巨噬细胞泡沫化。3、与对照组及OX-LDL模型组比,荷叶碱组自噬相关蛋白LC3II/LC3I表达显著升高(P<0.002),P62显著降低(P<0.05),自噬流增强(P<0.001),自噬小体增多,提示荷叶碱可促进细胞自噬。4、自噬抑制剂3-MA处理后,与荷叶碱单独处理组相比,细胞内脂质沉积显著增加(P<0.0001)、总胆固醇含量增加(P<0.05),与模型组相近,证明荷叶碱通过促进自噬抑制细胞泡沫化。5、与对照组及OX-LDL模型组相比,荷叶碱显著降低p-mTOR、p-Akt蛋白表达水平(P<0.05)。结论:荷叶碱可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路促进自噬,降低细胞内脂质沉积及总胆固醇含量,减少巨噬细胞泡沫化。