心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）是诊断心肌损伤的血清学标志物,可用于评估急性心肌梗死、急性冠状动脉综合征等心肌损伤相关疾病。心肌损伤发生后cTnⅠ释放到血液中,并在血液中逐步降解,其存在以cTnⅠ-C复合物为主,血清cTnⅠ既包含未降解的全长cTnⅠ也包括降解后的cTnⅠ片段。现有方法一般检测患者血消总cTnⅠ的含量而没有考虑其降解情况,目前对于血清cTnⅠ降解情况对心肌损伤临床诊断价值研究鲜有报道。本研究旨在建立血清中全长cTnⅠ、总cTnⅠ、cTnⅠ-C复合物的联合检测方法,通过总cTnⅠ、cTnⅠ-C复合物及全长cTnⅠ/总cTnⅠ 比值来判断心肌损伤患者的损伤程度、发病时长及疗效的及时预判。本研究统一将一株针对cTnⅠ稳定区域的单克隆抗体C30作为捕获抗体进行包被,采用稀土离子分别标记三株不同的单克隆抗体建立相应的时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）,其中针对cTnⅠ另一个稳定区域的单克隆抗体L83作为标记抗体进行总cTnⅠ的检测,针对cTnⅠ分子C末端的单克隆抗体L190作为标记抗体进行全长cTnⅠ的检测,针对cTnⅠ-C复合物的单克隆抗体L20c6作为标记抗体进行cTnⅠ-C复合物的检测。通过包被浓度、标记抗体稀释度、反应时间等条件的优化分别建立 Total-cTnⅠ-TRFIA（检测总 cTnⅠ）、Full-cTnⅠ-TRFIA（检测全长 cTnⅠ）、cTnⅠ-C-TRFIA法（检测cTnⅠ-C复合物）。并对建立的三种cTnⅠ-TRFIA法进行方法学评估,分析它们的灵敏度、精密度、特异性、准确度等。在三种cTnⅠ-TRFIA通过方法学评估后,分别测定样本血清的总cTnⅠ、全长cTnⅠ、cTnⅠ-C复合物浓度,并分析三者与临床cTnⅠ的化学发光免疫分析法（The chemiluminescence immunoassay,CLIA）检测结果的相关性。通过连续检测三名心肌损伤患者不同时间的血清全长cTnⅠ、总cTnⅠ、cTnⅠ-C复合物的浓度,计算患者不同时间的全长cTnⅠ占比（全长cTnⅠ/总cTnⅠ）,结合临床观察结果,比较三种方法测得的患者血清cTnⅠ浓度（总cTnⅠ浓度、全长cTnⅠ浓度、cTnⅠ-C复合物浓度）及全长cTnⅠ占比与临床cTnⅠ检测值对于判断患者发病时长及预后的价值。研究结果显示,Total-cTnⅠ-TRFIA的灵敏度为0.03 ng/mL,平均批内变异系数（CV）为4.78%、批间CV为7.97%,检测范围为0.03-40ng/mL,回收率为106.62%;Full-cTnⅠ-TRFIA 的灵敏度为 0.007ng/mL,批内 CV 为 3.59%、批间CV 为 8.06%,检测范围为 0.007-40ng/mL,回收率为 102.23%;cTnⅠ-C-TRFIA的灵敏度为0.011ng/mL,批内CV为4.72%、批间CV为8.83%,检测范围为0.011-40ng/mL,回收率为92.15%。肌钙蛋白T（cTnT）对三种方法均没有交叉反应。所以建立的三种cTnⅠ-TRFIA检测的灵敏度、精密度、回收率均符合诊断试剂的要求。在与临床cTnⅠ-CLIA检测方法相关性上:Total-cTnⅠ-TRFIA法与临床检测方法相关性最高（R2=0.9225）,Full-cTnⅠ-TRFIA法与临床检测方法相关性最低（R2=0.6238）,cTnⅠ-C-TRFIA法与临床检测方法相关性居中（R2=0.8868）。在血清样本检出cTnⅠ浓度的高低上:Total-cTnⅠ-TRFIA法测得的cTnⅠ平均浓度最高,为5.59 ng/mL;cTnⅠ-C-TRFIA法测得的cTnⅠ平均浓度次之,为4.01 ng/mL;Full-cTnⅠ-TRFIA法测得的cTnⅠ平均浓度最低,为2.12 ng/mL。临床cTnⅠ-CLIA检测法测得的cTnⅠ平均浓度为4.38 ng/mL,介于Total-cTnⅠ-TRFIA法和cTnⅠ-C-TRFIA法的结果之间。在被所有方法检测过的77份阳性血清中,以临床cTnⅠ-CLIA检测的临界值（0.11ng/mL）作为诊断异常的标准:临床cTnⅠ-CLIA检出率为100%（77例）,Total-cTnⅠ-TRFIA法检出率为100%（77例）,Full-cTnⅠ-TRFIA 法检出率为 90.9%（70 例）,cTnⅠ-C-TRFIA 法检出率为 98.7%（76例）。对三名连续检测的患者血清进行总cTnⅠ、全长cTnⅠ、cTnⅠ-C复合物及全长cTnⅠ占比的分析,总cTnⅠ和cTnⅠ-C复合物的浓度可以很好的反映患者心肌损伤的程度,全长cTnⅠ占比可以更好的提示发病时间,并且对预后的提示早于总cTnⅠ和cTnⅠ-C复合物的浓度变化,联合检测血清全长cTnⅠ与总cTnⅠ并计算全长cTnⅠ占比对临床诊疗具有更好的前瞻性,有助于心肌损伤的诊断与疗效评估。