抗凋亡蛋白BRE及相关蛋白在癌症和药物反应中的功能研究

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目的:目前癌症的检验与治疗仍是一个世界性难题,其机理和分子途径有待进一步阐明,本研究关注抗凋亡蛋白BRE及其相关蛋白ANXⅡ和TNFR1在不同肿瘤组织中的表达情况,探讨这些蛋白在不同肿瘤中发挥的作用,在肿瘤的发生与发展过程中这些蛋白与肿瘤之间的相互关系及其功能。同时也探讨PML蛋白与肌联蛋白Titin的相互作用及其对抗肿瘤药物LDM的反应。方法与结果:(1)用免疫组织化学的方法检测BRE, ANXⅡ和TNFR1在肝脏组织(84例),鼻咽癌(5例),胃癌(5例),肾癌(5例),卵巢癌(5例)和脑胶质瘤(5例)中的表达情况。BRE蛋白在肝正常组织中(5/5例)表达大部分呈阴性,在肝癌(42/56例)中,过表达明显,但是在不同的WHO分级中,BRE表达并没有明显不同。在鼻咽癌中BRE表达3例为阳性,在鼻咽癌的癌旁细胞中可见其表达呈现弱阳性(1例)。BRE在3例胃癌组织中表达呈阳性。在肾癌的颗粒细胞癌和透明细胞癌中,BRE表达较高(5例)。卵巢癌中BRE表达也较高,3例呈阳性。在星形细胞瘤和胶质母细胞瘤中,BRE过表达明显(4例)。ANXⅡ在肝癌(44/56例)中高表达,在正常肝细胞中表达呈阴性(5/5例),在鼻咽癌的癌旁上皮组织表达呈阳性(1例),3例组织中ANXⅡ表达呈阳性。在胃癌表达呈下调状态,有4例表达呈阳性。在肾癌中表达较弱,有4例呈阳性表达。在卵巢癌中4例表达呈阳性,在透明细胞癌中表达较强(1例)。在胶质瘤中表达阳性组织为4例。TNFR1在肝癌(33/56例)中过表达,在鼻咽癌中表达呈弱阳性(4例),在胃癌中表达阳性组织为4例,在肾癌中为3例,在卵巢癌中表达阳性组织3例,在胶质瘤中表达较弱,表达阳性组织为4例。(2)用免疫荧光的方法检测PML和Titin蛋白在结肠癌Lovo细胞株的共定位情况,发现两者在Lovo细胞核内很好的重合。(3)用MTT的方法检测成纤维细胞PML++和PML--对药物LDM的反应,24h后,LDM浓度为10(-10)mol/L细胞已开始出现凋亡。结论:(1)BRE在肝癌,胃癌,肾癌,卵巢癌,脑胶质瘤中过表达,在鼻咽癌中表达较弱。ANXⅡ在肝癌,卵巢癌,胶质瘤中过表达,在鼻咽癌,胃癌,肾癌中表达较弱。TNFR1在肝癌中过表达,在鼻咽癌中表达呈弱阳性,在胃癌,肾癌,卵巢癌,胶质瘤中表达呈明显阳性。(2)PML和Titin蛋白在Lovo细胞核中共定位。(3)成纤维细胞PML++和PML--细胞对药物LDM反应没有明显不同。BRE在肿瘤中的高表达是肿瘤细胞对凋亡信号途径所产生的调节,ANX-II的高表达使得肿瘤细胞能进一步入侵组织和转移,而TNFR1能增强细胞对促炎症因子TNF的反应,诱导细胞生长。转录激活因子PML和肌肉蛋白Titin之间的相互作用提示,这个过程可能包括信号从肌小节转移至核内并激活新的基因进行组织修复。PML野生型和基因敲除细胞对抗癌药物LDM的反应提示正常细胞和癌细胞对抗肿瘤药物反应过程中PML蛋白不是唯一的途径。
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