【摘 要】
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【目的】研究黄藤化学成分抗深部真菌作用,以寻找有效、价廉、副作用小的抗真菌药物。【方法】采用琼脂打孔法对黄藤甲醇、氯仿提取物进行初筛,以抑菌圈大小评价其对白色念珠
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【目的】研究黄藤化学成分抗深部真菌作用,以寻找有效、价廉、副作用小的抗真菌药物。【方法】采用琼脂打孔法对黄藤甲醇、氯仿提取物进行初筛,以抑菌圈大小评价其对白色念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌、新生隐球菌的抑菌活性。按美国临床实验室标准化委员会提出的真菌敏感性试验方案J(M27-A),采用微量稀释法测定其分离提取的单体化合物的抗菌活性,观察最小抑菌浓度。在此基础上,采用棋盘式微量稀释法测定与氟康唑联合应用后对白色念珠菌耐药菌株的抑菌效果,以部分抑菌浓度指数来评价;并进一步以体外琼脂扩散法和时间—杀菌曲线法验证其协同作用。【结果】初筛实验结果显示:黄藤根皮部、髓部、藤茎具有相近的活性,各样品的氯仿、甲醇提取物均有类似的活性,抑菌圈为10~20mm。微量稀释法实验显示:所提取的化合物均具有抗深部真菌活性,MIC值平均在80~640μg/ml,其中,8-羟基罗默碱为从黄藤中得到的新化合物,具有较强的抗菌活性,MIC值平均在320~640μg/ml。其单体化合物与氟康唑合用后能明显降低氟康唑和单体化合物的用药量,呈现协同作用(FICI<0.5)。在琼脂扩散实验中:在不含药的沙堡氏固体培养基(SDA)上,10μg氟康唑药片和128μg、64μg、32μg的单体化合物分别单用时,未见抑菌圈或抑菌效果很弱,但两药合用后抑菌圈明显增大。时间—杀菌曲线研究也进一步证实了此结论,单用单体化合物对生长曲线基本没有影响,氟康唑有弱的抑菌作用,药物合用后抑菌效果明显强于各药单用,而且菌液浓度越低协同作用越强。【结论】黄藤所含化学成分具有较好的抗深部真菌活性,并且可以逆转白色念珠菌对氟康唑的耐药性。
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