多胺对小菜蛾行为和卵黄蛋白合成的影响

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多胺(Polyamines)如腐胺(putrescine)、亚精胺(spermidine)及精胺(spermine)是一类带正电荷的小分子脂肪族化合物,广泛存在于原核和真核细胞内。目前的研究表明,多胺对生物大分子的合成,细胞的生长、分化等有重要的调节作用,可参与调节昆虫的生长发育等多种生理过程。但由于昆虫生理过程及多胺代谢过程的复杂性,多胺对昆虫生理过程的调节机理还不清楚。因此,研究多胺在小菜蛾行为及卵黄蛋白合成中的作用,对于进一步明确多胺生理功能,阐明多胺参与昆虫生理过程的机理具有重要意义。本文以小菜蛾Plutella xylostella L.为研究对象,通过行为选择反应、触角电位(EAG)反应以及触角可溶性蛋白变化的研究,探讨了多胺在小菜蛾行为选择过程中的功能;在建立了昆虫体内多胺的高效液相色谱(HPLC)测定方法的基础上,研究了外源多胺和激素与小菜蛾蛹期多胺代谢的相互关系;最后通过电泳和免疫技术,分析了多胺和激素与小菜蛾卵黄蛋白合成之间的关系。主要研究结果如下: (1)多胺对小菜蛾行为的影响 与对照蒸馏水相比,小菜蛾在交配前和交配后对精胺(spm)、亚精胺(spd)和腐胺(put)这3种多胺均有明显的趋性反应,但对3种多胺两两之间的选择则无显著差异;在对3种多胺和甘蓝Brassica oleracea L.叶汁之间的选择中,除未交配雄蛾对腐胺有明显的趋性(与甘蓝叶汁比较)和交配后雌蛾对甘蓝叶汁有明显的趋性(与精胺比较)外,其他均没有显著差异。结果表明多胺对小菜蛾具有引诱作用。 与对照蒸馏水比较,小菜蛾在交配前和交配后对spm、spd和put这3种多胺均有明显的EAG反应;但与甘蓝叶汁相比,除对0.1%spd的EAG反应和未交配小菜蛾雌蛾对0.1%put的EAG反应明显较高,对其它浓度多胺的EAG反应明显较低;对不同浓度多胺之间的比较发现,小菜蛾对低浓度(0.1%)多胺的EAG反应明显高于对高浓度(1%)多胺的EAG反应。 3种多胺(put、spd和spm)和多胺抑制剂2-氟甲基鸟氨酸(DFMO)处理后,明显改变了未交配和已交配小菜蛾对甘蓝叶汁以及不同浓度多胺(put、spd和spm)的EAG反应。与spm和put相比,spd对小菜蛾触角活性的影响最大。与丙酮对照相比,多胺和DFMO处理后,雄性小菜蛾对雌性性信息素的EAG反应也明显改变,put和spd处理后明显减弱了雄性小菜蛾对雌性性信息素的EAG反应,DFMO稍微减弱,而spm则增强了雄性小菜蛾对雌性性信息素的EAG反应。进一步研究表明,3种多胺和DFMO处理后影响小菜蛾触角可溶性蛋白的合成,而且经过spd处理后,雌性小菜蛾触角中出现了一条110kD左右的特异带。 (2)多胺和激素对小菜蛾蛹期多胺含量的影响 建立了丹磺酰氯柱前衍生高效液相色谱(HPLC)快速测定昆虫体内多胺含量的方
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