人类血红蛋白是一种稳定的四聚体结构,由两条α链和两条β链组成,行使携氧的功能。其中编码某一条链的基因发生突变会导致四聚体结构遭到破坏,造成血红蛋白类疾病,如β地中海贫血正是由于β珠蛋白基因突变所导致。β珠蛋白基因簇在胚胎期、胎儿期和成体期会发生两次开关转换,依次表达ε,γ和β珠蛋白基因,对应编码HBE,HBG和HBB三种蛋白。对于β地中海贫血,临床上有若干治疗方法,其中一种就是用药物诱导成体中已沉默的胎儿期珠蛋白HBG重新激活表达,以弥补成体β珠蛋白HBB的不足,从而缓解症状。这种治疗方法避免了外源基因的转入和异体移植。但这种治疗方法的疗效不稳定。且β-珠蛋白基因簇的开关转换机理至今未得到完整的阐述,限制了这一治疗方案的发展完善。本研究的目的在于探索TET2和γ珠蛋白激活表达之间的关系,为揭示该基因簇开关转换的机制提供理论依据。TET(Ten Eleven Translocation)是DNA双加氧酶家族,催化5mC氧化成5hmC,其中TET2主要在血液系统中发挥作用,与特定的转录因子或者染色体组蛋白翻译后修饰相关的酶相互作用,调节基因的转录,与小鼠β珠蛋白基因簇上胚胎期β珠蛋白启动子上DNA羟甲基化相关。TET2与γ珠蛋白之间的相互作用尚无系统的研究。本文的研究方法主要是在K562细胞中转染shRNA下调TET2的表达,来研究其对药物诱导γ珠蛋白表达效率的影响。我们的结果显示,用适宜浓度的5-氮胞苷或氯化高铁血红素处理72小时后,K562细胞中γ珠蛋白的表达量可达到对照组的近6倍。在此期间,TET2的表达水平无显著性差异。下调TET2后,γ珠蛋白在药物诱导下的表达水平下降到TET2正常表达的70%左右。对γ珠蛋白基因编码区上CpG位点密集处DNA甲基化修饰状态的检测发现,这一区域的DNA甲基化修饰率非常低,几乎都处于未甲基化的状态。另一方面,TET2下调直接影响了与γ珠蛋白基因表达密切相关的转录因子的表达,其中促进γ珠蛋白表达的GATA1和NF-E4表达量下调至80%左右,而抑制γ珠蛋白表达的KLF1则上调至1.4倍。综述所述,TET2在K562细胞中能促进γ珠蛋白的表达,相比催化γ珠蛋白基因本身羟甲基化而言,TET2的直接作用靶点更倾向于调控其表达的转录因子。