论文部分内容阅读
大白菜(Brassica rapa L.ssp.pekinensis)原产于我国,在亚洲,特别是中国、日本和韩国,大白菜的栽培面积很大,是很重要的一种蔬菜。大白菜具有自交不亲和性(Self-incompatibility,SI),其自交不亲和性是由存在复等位基因的不亲和位点(S-locus)控制的。自交不亲和系的基因型信息不仅可以保证一代杂种的双亲在种子生产时杂交亲和,而且可以用于品种的纯度鉴定。传统的鉴定芸薹属作物 S 等位基因的方法是测交法。随着鉴定的 S 等位基因数目的增多,用新的自交不亲和系与全部测试系杂交授粉,不管是计数种子数还是观察授粉后柱头花粉管生长数目,都必须等到植株开花,并且自交不亲和的表现型容易受到环境条件和植株生理状况的影响,费时费力,准确性又差。利用分子生物学的方法进行 S 等位基因的分析,可以大大提高育种的效率。 本试验内容具体分为两部分: 1.本试验所用的材料是经过多代自交选育,园艺学性状和自交不亲和性比较稳定的10个早熟性自交系和10个晚熟性自交系。通过田间完全双列杂交计算亲和指数,试验结果表明: 1.1早熟的10个自交系中至少存在了7种S基因型。即B30003和B30044具有同一种S基因型,并且S基因杂合,该杂合基因在雌雄中的关系不同,在花粉中呈显隐性关系,而在柱头中是独立的关系。B30015和B30095、B30059和B30069可认为具有相同的S基因型,B30009、B30021、B30022、B30071都独自具有一种S基因型。 1.2晚熟的10个自交系的S基因型各不相同,B30083的S基因型是B30186和B30194S基因的杂合体,杂合基因在柱头和花粉中的关系也不相同,花粉中呈显隐性关系,柱头中呈独立关系。 2.在前面的试验基础上,通过PCR-RFLP对上述20个自交系的S基因型进行分析,结果如下: 2.1 B30003、B30021、B30044、B30071、B30124、B30130和B30162没有扩增出ClassI SLG片段。B30003、B30021、B30044、B30130、B30162没有扩增出SRK片段。20个自交系全部扩增出了ClassII SLG片段。 2.2可用于SRK片段酶切的限制性内切酶的种类多一些,两种SLG片 1<WP=7>大白菜自交不亲和基因的分子鉴别段可以用同样的内切酶,但用于SRK片段的内切酶有些不能用于SLG片段。ClassII SLG片段的酶切片段多态性最差,SRK片段的酶切片段多态性比SLG片段的酶切片段多态性要好一些。2.3对ClassI SLG片段进行酶切,早熟组中B30009和B30059、B30069这两个S基因型具有特异酶切片段;晚熟组中B30190与B30206的S基因型具有特异酶切片段。2.4对Class II SLG片段进行酶切,只有晚熟组中的B30083的S基因型具有特异酶切片段。2.5对SRK片段进行酶切,早熟组中B30009、B30071和B30059、B30069这三个的S基因型具有特异酶切片段;晚熟组中B30124、B30190和B30206这三个的S基因型具有特异酶切片段。