钙调磷酸酶（Calcineurin,CaN）是一种直接受Ca²⁺/钙调素（CaM）调节的丝/苏氨酸蛋白磷酸酶,在调控真菌生长发育及致病性方面起重要作用。本论文对玉米大斑病菌钙调磷酸酶B亚基基因（calcineurin B,CnB）进行了克隆、生物信息学分析和反义抑制表达分析,初步研究了钙调磷酸酶在玉米大斑病菌生长发育中的作用。根据已知病原真菌CnB基因氨基酸序列保守区域设计简并引物,采用cDNA末端快速扩增（Rapid Amplification of cDNA Ends,RACE）技术,首次在玉米大斑病菌中克隆得到了CnB基因全长cDNA序列（GenBank登录号:EF 469732）和DNA序列。生物信息学分析表明,CnB基因含4个外显子和3个内含子,最大开放阅读框为525 bp,编码174个氨基酸。蛋白保守结构域分析显示,CnB基因的预测蛋白含有高度保守的4个“EF-hand”Ca²⁺结合区域,属于Ca²⁺结合蛋白家族成员,与小麦叶枯病菌（Phaeosphaeria nodorum）、灰葡萄孢（Botrytis cinerea）、粗糙麦孢霉（Neurosporacrassa）等植物病原真菌中CnB基因有90%以上的氨基酸同源性。Swiss-model预测三维结构发现,CnB空间结构由8个螺旋和4个折叠片组成,形成4个螺旋-环-螺旋区域,这与CnB蛋白4个“EF-hand”保守结构功能域相吻合。利用Genomic Walldng技术获得CnB基因5’端上游约2 kb的DNA序列。分析发现,该区域含有明显的启动子活性结构,但没有发现类似TATA盒的元件。存在光应答转录因子G-box以及与细胞分化相关的转录因子DET1、CDA-1等结合元件,推测CnB基因可能在细胞形态建成及光信号传导通路中起作用;发现热激转录因子（HSF）结合元件,推测CnB基因可能在真菌的耐热性和抗逆性方面发挥作用。以CnB基因的DNA序列为探针进行Southern杂交试验,结果表明CnB基因在玉米大斑病菌中以单拷贝形式存在。在优化玉米大斑病菌原生质体制备和再生条件的基础上,基于pSOI质粒构建了玉米大斑病菌CnB基因正义、反义表达载体。利用PEG介导的转化系统,通过转化玉米大斑病菌原生质体获得23个阳性转化子。对继代培养后的阳性转化子进行PCR验证,获得5个潮酶素磷酸转移酶基因插入的转化菌株。转化菌株菌丝细腻,菌落平坦致密,其中两个转化菌株菌落生长速度缓慢。