甘蔗叶黄酮类成分与生物活性研究

来源 :广西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qqq398705749
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:本文以甘蔗(Saccharum sinense Roxb.)的叶为研究对象,首先对甘蔗叶总黄酮展开提取与纯化工艺研究及其多种品种黄酮的含量测定,同时结合药效筛选追踪,研究甘蔗叶中黄酮类化学成分,为开发具有抗肿瘤抗龋齿活性的新的药用资源提供物质基础和科学依据。  方法:本文采用L9(34)正交试验优化乙醇回流提取甘蔗叶总黄酮工艺,并考察不同极性的大孔树脂对甘蔗叶总黄酮的静态吸附量和解吸率,确定甘蔗叶总黄酮最佳提取纯化工艺。以NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色法考察10种蔗叶品种在不同时期总黄酮动态累积情况,以期获取不同甘蔗叶黄酮的动态变化。结合活性追踪方法,采用聚酰胺柱色谱法、葡聚糖凝胶 LH-20色谱法和重结晶法等现代分离方法和技术对甘蔗叶黄酮成分进行化学成分的分离纯化,通过理化检验、UV、IR、1H-NMR、13C-NMR和MS等方法对所得化合物进行结构鉴定。甘蔗叶黄酮类成分体外抗肿瘤活性研究,运用MTT法分别取对数生长期的细胞株 BEL7404,SK-OV-3,NCI-H460,CNE,Caco-2,Hela共六种癌细胞,以 IC50为考察指标确定其抗肿瘤活性物质。甘蔗叶黄酮类成分抗龋齿活性研究,采用二倍稀释法分别取对数生长期的变异链球菌和粘性放线菌,确定各成分的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。  结果:甘蔗叶提取总黄酮提取工艺结果表明最佳提取工艺为提取温度为70℃,提取乙醇浓度为70%,提取时间为4h,固液比为1:25,甘蔗叶总黄酮纯化AB-8大孔树脂,吸附率为57.57%,解吸率为77.26%。通过比较甘蔗叶10种品种不同采收期的总黄酮含量差异,发现总黄酮含量最高是采摘于11月的桂糖00236(23.208mg/g),其他品种相应的最佳采收期主要集中在10月到11月之间。从甘蔗叶中分离得到3个化合物,并鉴定3个化合物,分别为:5,7,4′-三羟基-3′,5′-二甲氧基黄酮即苜蓿素(tricin,SC1)、5,7,4′-三羟基黄酮-8-C-β-D-葡萄糖苷即牡荆素(vitexin,SC2)和5,7,3′,4′-四羟基黄酮-8-C-β-D-葡萄糖苷即荭草素(orientin,SC3),以上3个化合物均为首次从该植物中分离得到。通过甘蔗叶黄酮成分对多种细胞株,结果表明甘蔗叶黄酮组分均表现出一定的抑制活性,其中单体 SC1对 BEL7404,SK-OV-3,NCI-H460,CNE,Hela和Caco-2肿瘤细胞有抑制作用且存在剂量依赖性,IC50分别为55.50μg/mL、108.07μg/mL、192.90μg/mL、73.82μg/mL、121.5μg/mL和198.12μg/mL;甘蔗叶黄酮SC2对BEL7404,SK-OV-3,NCI-H460,CNE和Hela肿瘤细胞均有明显的抑制作用,IC50分别为152.43μg/mL、282.87μg/mL、276.75μg/mL、139.18μg/mL和277.52μg/mL;甘蔗叶黄酮SC3对BEL7404和Hela有明显的抑制作用,IC50为176.68μg/mL和230.14μg/mL。通过研究黄酮成分对变异链球菌和粘性放线菌的作用结果表明,总黄酮95%乙醇洗脱流份(S5)和0.1%乙酸醇溶液洗脱流份(S6)对变异链球菌和粘性放线菌的最小抑菌浓度均为1mg/mL;S6对变异链球菌最小杀菌浓度为4mg/mL。  结论:甘蔗叶总黄酮提取工艺中发现乙醇浓度影响最大,提取温度次之;纯化工艺中AB-8大孔树脂吸附和解吸率优于其他3种大孔树脂。通过考察10种甘蔗叶品种不同采收期的总黄酮动态累积情况可知,总黄酮含量最高的是采摘于11月的桂糖00236。从甘蔗叶总黄酮中首次分离得到3个化合物:苜蓿素(tricin)、牡荆素(vitexin)和荭草素(orientin)。甘蔗叶黄酮类成分抗肿瘤筛选结果发现化合物 SC1对BEL7404,SK-OV-3,NCI-H460,CNE,Hela和Caco-2肿瘤细胞具有一定的体外抑制活性;化合物SC2对BEL7404,SK-OV-3,NCI-H460,CNE和Hela肿瘤细胞具有一定的体外抑制活性;化合物SC3对BEL7404和Hela具有一定的体外抑制活性。研究发现甘蔗叶黄酮成分中有多种有效抑菌成分,对口腔常见致龋齿菌有抑制作用,其中S5和S6对变异链球菌和粘性放线菌抑菌作用,与茶多酚效果相当;对变异链球菌杀菌效果,S6与茶多酚相当。
其他文献
近年来,中职教育发展十分迅速,但是随之而来的教学问题也很多.中职课堂一直是以培养学生的动手能力为主要目标的,在中职德育课堂教学中,是中职学生获得思想政治教育的主要途
探究性学习是当前教学当中的主要推进模式,它的出台并不是对传统教学模式的完全否定和替代.通过探究性学习的推进,凸显了学生在课堂当中的主人翁地位,能够让学生们主动参与,
目的:本课题以左金丸中的黄连、吴茱萸两味药材组成的中药复方为研究对象,将传统的丸剂进行二次开发,制备成适宜临床应用的新制剂—漂浮片,建立质量标准。同时结合现代药理学研究
任务型教学法在英语教学圈中非常受欢迎.2001年,国家教育部通过新课程标准,此标准建议在英语教学中实施任务型教学法.自此以后,我国小学英语口语教学就已开始实施任务型教学
当今社会,教育已成为全民关注的话题,上至国家,下至百姓.我国历史悠久,文化底蕴丰富.从孔子开始,我国的先贤就在探索着适合学生老师的教学方法以及教学原则.现在是开放性思维
随着我国教育事业的不断发展,对于启发式的教学方法的研究也越来越深刻.这种教学方法主要是针对当前教学过程中,对于学生能力的培养是有着非常重要的作用.主要对高中生物教学
随着我国教育的不断改革,对学生核心素养的培养越来越成为国家教育部门所重视的对象,因此,学生核心素养的培养对于历史教学同样如此.主要探究学生核心素养的概念理解,通过从
目的:通过实验,对名老中医四十年经验方的提取工艺、制剂成型工艺以及质量标准进行系统研究,制成符合中成药标准的六类新药,为填补国内灌肠剂未曾市面销售的空白。   方法:通
课堂提问是教师在教学实践中最基本的一种教学手段,有质量的课堂提问不但可以高质量地完成教师在教学中的任务,还可以带动学生的积极性,锻炼学生的逻辑思维能力,也增加了教师