论文部分内容阅读
目的:皮肤光老化的发生和紫外线(UV)诱导过度生成活性氧自由基(ROS)以及炎症反应等有关,因而抗炎和抗氧化可以作为治疗皮肤老化的方法。人参总皂苷是人参中主要的活性物质,有抗氧化,抗衰老等多种药理作用,但人参总皂苷皮肤透过性差限制了它的开发利用。采用脂质体这一新型载药系统包埋人参总皂苷,以期提高其皮肤透过性,更好的发挥作用,并通过观察人参总皂苷对大鼠光老化皮肤的治疗作用,从组织病理学、氧化应激损伤、炎症反应等角度初步探讨可能存在的治疗机制。方法:首先建立人参总皂苷体外分析方法:采用高效液相色谱法进行人参总皂苷含量测定;采用乙醇注入法制备人参总皂苷脂质体,采用超滤离心法分离游离药物与载药脂质体,建立了人参总皂苷脂质体的包封率测定方法;采用单因素考察法优化人参总皂苷脂质体的处方及制备工艺;对人参总皂苷脂质体进行质量评价和体外皮肤透过性研究;通过建立大鼠光老化模型,从外观形态及皮肤厚度初步评价人参总皂苷对大鼠光老化皮肤的治疗作用,对大鼠光老化皮肤组织进行HE和醛品红染色观察皮肤组织形态学变化,测定大鼠皮肤组织中MDA含量、GSH-Px、SOD酶活力,基质金属蛋白酶MMP-1和MMP-3含量,炎症因子IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子TNF-α含量,初步探讨人参总皂苷对大鼠皮肤光老化模型治疗作用可能的机制。结果:人参总皂苷脂质体的最佳处方为:氢化大豆磷脂与人参总皂苷摩尔比为1:0.4;胆固醇与氢化大豆磷脂的摩尔比为1:3.5;有机相与水相的体积比为1:9;搅拌时间为4 h;验证性试验测得人参总皂苷脂质体的平均包封率为63.38%,平均粒径为111.0 nm;PDI为0.059,Zeta电位为-5.72 mv;人参总皂苷脂质体冻干粉的包封率为61.21%;体外透皮试验结果显示,人参总皂苷溶液24 h内未检测到透过量,人参总皂苷脂质体的皮肤24 h内总透过率为85.46%。人参总皂苷对大鼠光老化皮肤治疗作用的研究中,与模型组相比,人参总皂苷脂质体组及溶液组皮肤均有不同程度的好转,HE及醛品红染色结果表明人参总皂苷能够有效的改善UV照射引起的皮肤角质层增厚、弹性纤维断裂,聚集成团等现象;与模型组相比,人参总皂苷脂质体组皮肤组织中MDA含量明显下降,GSH-Px、SOD酶活力明显提高,炎症因子IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子TNF-α含量,基质金属蛋白酶MMP-1和MMP-3含量明显升高。结论:采用单因素考察法优化人参总皂苷脂质体的制备工艺,并对其进行质量评价;体外透皮试验结果表明,人参总皂苷原药皮肤透过性差,而脂质体能够明显提高人参总皂苷的皮肤透过性;局部使用人参总皂苷脂质体对大鼠光老化皮肤有一定的治疗作用,这种保护作用可能与抑制UV诱导皮肤脂质过氧化,提高抗氧化酶SOD和GSH-Px活力,减少炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达,降低MMPs含量有关。