论文部分内容阅读
目的: 1、建立母爱剥夺的实验动物模型。实验以SD大鼠为研究对象,通过限制筑巢材料为母爱剥夺的手段,对新生SD大鼠进行生命早期应激,建立大鼠母爱剥夺模型。 2、利用免疫组织化学技术检测母爱剥夺大鼠痛情绪相关核团的fos蛋白的表达,研究母爱剥夺导致痛情绪加剧的神经机制。 方法: 1、建立大鼠母爱剥夺模型,将6只初次怀孕16天母鼠单笼饲养,生产后,调整每笼饲养7-8只新生大鼠及1只哺乳期母鼠,分娩的48只新生大鼠被随机分为对照组24只和母爱剥夺组24只。对照组给予足量的筑巢材料(50g脱脂棉花),正常饲养;母爱剥夺组在出生后的第2天起给予对照组的1/3筑巢材料(16.7g脱脂棉花),其它条件均相同。2周后断奶。 2、按照F-CPA试验第4天的区别,将母爱剥夺组和对照组各分3个小组:F-CPA(15min)组、F-CPA(2h)组、F-CPA唤醒组。F-CPA(15min)组在F-CPA试验的第4天自由探索15min,F-CPA(2h)组在F-CPA试验的第4天自由探索2h,F-CPA唤醒组在F-CPA试验的第4天放入福尔马林匹配室2h对痛经历进行唤醒。 3、在结束行为学测试后,用2%戊巴比妥钠(30mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠。取脑脊液和血标本后,急性断头取脑,制备大鼠的大脑石蜡标本,常规切片,行HE染色及运用免疫组化技术检测fos蛋白在成年大鼠大脑组织中的表达。 结果: 1、母爱剥夺对大鼠应激激素水平的影响:F-CPA(15min)对照组大鼠第4天F-CPA实验后的血清皮质醇浓度为:141.7±15.4(ng/ml),而F-CPA(15min)母爱剥夺组大鼠第4天F-CPA实验后血清皮质醇浓度为158.0±22.7(ng/ml)(t=-3.097,P=0.01)。F-CPA(15min)对照组大鼠脑脊液的ACTH浓度为173.6±21.7(ng/ml),而F-CPA(15min)母爱剥夺组ACTH浓度为186.2±16(ng/ml)(t=-2.533,P=0.028)。[这部分实验由同门徐银权完成] 2、F-CPA(15min)对照组人鼠(n=7)在F-CPA实验中第1天在条件刺激匹配室的平均活动时间为485.6±146.9s,第4天的平均活动时间为368.1±137.0s(t=3.719,P=0.01)。F CPA(15min)母爱剥夺组大鼠在F-CPA实验中的第1天在条件刺激匹配室的平均活动时间为490.8±154.8s,第4天平均活动时间为227.1±117.6s(t=4.867,P=0.005)。F-CPA(15min)对照组回避分数为117.2±83.6s,F-CPA(15min)母爱剥夺组回避分数为263.5±132.4s(t=-2.422,P=0.034)。对照组大鼠的平均体重为294.3±59.3g,母爱剥夺组大鼠平均体重为300.1±67.2g(P>0.05)。 3、在F-CPA唤醒对照组,可见fos阳性细胞在梨形皮质、前额叶皮层、扣带皮质、腹后外侧核、副嗅束床核有表达。在F-CPA唤醒母爱剥夺组,可见密集的fos阳性神经元分布于基底内侧杏仁核前部、纹状体尾壳核、岛叶皮质、扣带皮质、乳头体外侧核、梨形皮质、前额叶皮层。在岛叶皮层、髓板内核内侧核区,F-CPA唤醒母爱剥夺组有表达,F-CPA唤醒对照组无表达。 结论: 1、新生SD大鼠在出生后的2周通过限制筑巢材料的方式可以建立母爱剥夺大鼠模型。 2、痛情绪相关脑核团岛叶皮层、丘脑髓板内核内侧参与了大鼠母爱剥夺所致痛情绪加剧。