四川华鳊繁殖生物学初步研究

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四川华鳊(Sinibrama taeniatus)为长江上游珍稀特有的一种小型经济鱼类,分布范围狭窄,喜栖于江河中上层,繁殖季节到水流较急的浅水石滩上产卵,而近年来,为补偿电站及航电枢纽建设等对其造成的影响,四川华鳊被四川省列为重点增殖放流对象,对其繁殖生物学的研究迫在眉睫。实验室自2016年起开始驯养采自四川眉山的四川华鳊,基本掌握其养殖方法,并在驯养四川华鳊中挑选健康成鱼,取不同时期的性腺进行生殖细胞发生的研究;于2017年5月从四川眉山渔民处一次性购买四川华鳊1000余尾,在实验室暂养两周后,挑选健康成鱼600尾统一养殖,2017年6月至2018年8月,每月取雌雄鱼性腺各10尾,作为性腺周年变化研究的实验材料。本文围绕四川华鳊人工繁殖所需掌握的基础资料进行研究,利用大体解剖、组织切片技术对生殖细胞发育及周年内性腺发育进行观察,使用ImagePro Plus、SPSS、Origin、Adobe Illustrator等软件对实验结果进行测量、分析、制成图表,同时,还使用人工催产技术对其产卵类型进行了验证。主要结果及结论如下:1.明确了四川华鳊卵子发生过程中结构变化特点及规律四川华鳊卵子发生可分为5个时相:卵原细胞时相(Ⅰ时相)、单层滤泡时相(Ⅱ时相)、卵黄泡出现时相(Ⅲ时相)、卵黄充满时相(Ⅳ时相)和成熟卵子(Ⅴ时相),四川华鳊卵原细胞存在2种形态,分别为早期卵原细胞和有丝分裂过程中的卵原细胞,前者细胞核内有中央大核仁,而后者细胞核内的中央大核仁消失,核内有散乱分布的染色质;同时将早期初级卵母细胞划入Ⅱ时相,此阶段细胞核膜边缘出现多个小核仁,将其作为小生长期开始的标志,并将嗜碱性最强的阶段划为Ⅱ时相中期,卵黄核在此阶段出现;Ⅲ时相中后期卵黄泡即携带大量卵黄物质运送至细胞中央,卵黄泡尚未到达的核周区域还有大量嗜酸性卵黄颗粒,应为内源性卵黄;进入Ⅳ时相后卵黄泡开始减少用于细胞生长,卵黄物质提前积累使得卵母细胞在快速生长的同时卵黄物质也迅速充满胞质,为卵子的成熟节约了时间。因此,当四川华鳊雌鱼卵巢内有较多的卵母细胞进入Ⅲ时相后,需为亲鱼提供更多的营养;卵母细胞发育至Ⅳ时相晚期即可进行催产。2.明确了四川华鳊精子发生过程中结构变化特点及规律在四川华鳊精子发生过程中,生精细胞嗜碱性逐渐增强,细胞体积渐小,核质比增大。精原细胞可分为两种,A型精原细胞体积显著小于B型精原细胞(P<0.05),光学显微镜下可观察到A型精原细胞有中央大核仁,核膜清晰,而B型精原细胞核内嗜碱性物质散乱分布,细胞核外拟染色质小体明显减少;细胞质桥从精原细胞有丝分裂开始出现,直至精细胞变态中后期才消失,保证了同一精小囊内生精细胞的同步发育;精子细胞变态过程中可观察到互相垂直的基体和近端中心粒,晚期出现中心粒附属物并在精子成熟前逐渐萎缩至消失,近端中心粒也在精子成熟时消失;四川华鳊精子头部近圆形或稍不规则,无顶体,核空泡小,核凹窝不发达,尾部具两侧对称的侧鳍,轴丝为“9+2”双联体微管结构。3.明确了在养殖条件下四川华鳊性腺的周年变化规律,为实现全人工繁殖奠定了基础四川华鳊雌鱼体长、体重均极显著大于雄鱼(P<0.01)。雌鱼性腺成熟系数在一周年内出现两次峰值,分别在春季5月和秋季9月,产卵高峰分别为春季的5-6月和9-11月;组织学观察表明,4-10月均有部分雌鱼卵巢处于Ⅳ期,春季繁殖高峰期后大部分雌鱼卵巢仍处于Ⅳ期,其内有少量退化卵子,养殖条件下卵母细胞不能发育成熟,而是停留在Ⅳ时相末,需经人工催产,产后的卵巢内仍有大量早期卵母细胞,适宜条件下可发育至催产前的阶段,经人工催产后产出;11月温度降低,卵巢进入退化期,并以Ⅱ期越冬。雄鱼较雌鱼性腺成熟更早,性腺成熟系数在4月-10月始终保持着较高水平,此时多为Ⅴ期精巢,超过半年的时间里都有成熟精子产生。总体而言,四川华鳊雌鱼卵巢内卵母细胞不同步发育,雄鱼精巢在发育中后期也存在不同步现象,繁殖期前后雌雄成鱼性腺系数标准差均较大,表明群体中性腺发育存在时间差,在较长的时间内鱼群可能分批次繁殖,同时,同一尾雌鱼卵巢内卵母细胞也能多次成熟,分批产卵。结论:通过本研究搞清楚了四川华鳊生殖细胞发生的基本规律,特别是掌握了人工养殖条件下性腺的周年变化规律,明确了在养殖条件下,该鱼可以达到催产条件,通过催产可以实现人工繁殖,为实现该鱼的全人工繁殖奠定了基础。并初步发现了该鱼有可能一年多次产卵的特点,为进一步探究四川华鳊一年多次繁殖技术提供了重要的线索。
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