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血栓栓塞引起的心血管疾病已成为危害人类健康和生命的重大疾病,血小板活化聚集在血栓形成过程中负有关键性的作用。食醋含有丰富的生理活性物质,如有机酸、糖类和氨基酸等。本文首次以60%乙醇提取得到高粱醋提取物(Sorghum Vinegar Extract,SVE),并对SVE的组成进行鉴定。研究了以糖醇和单糖类为主要成分的SVE的抗血小板聚集活性,并深入探究其作用机制,最终揭示了高粱醋糖醇和单糖类化合物对血小板聚集引起的心血管疾病的防治作用。结果如下:首先,采用超声波辅助乙醇提取法,得到高粱醋乙醇粗提取物。经AB-8大孔树脂柱(50 cm×2 cm)分离纯化,收集洗脱液,经过冷冻干燥后得到SVE。利用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)鉴定SVE的组成,从中检测出56个物质,通过标准质谱库检索和人工解析,鉴定得到其中的25种物质,相对含量占SVE的52.63%。主要包括单糖(44.24%)、糖醇(6.77%)、乙基葡糖苷(1.35%)和3,4-亚甲二氧基苦杏仁酸(0.27%)。结果表明,糖醇和单糖类物质占SVE的51.01%,是其主要成分。其次,采用光学比浊法测定SVE的抗血小板聚集活性。结果表明,SVE对花生四烯酸(AA)、胶原、二磷酸腺苷(ADP)和凝血酶诱导的血小板聚集都具有显著的抑制作用(p<0.05),且抑制作用随SVE浓度的升高而增强。以阿司匹林(ASA)做阳性对照组,0.50 mg/mL的ASA可将AA诱导的血小板聚集率减小到6.35%±0.58%;而相同条件下,同浓度的SVE作用后AA诱导的血小板聚集率降低至10.35%±0.46%。由此可见,SVE可以有效的抑制血小板聚集,是一种多位点的血小板聚集抑制剂。最后,采用酶联免疫分析法,利用标准物试剂盒研究了 SVE对AA代谢信号途径的影响。结果发现,SVE能够显著抑制AA代谢途径中环氧化酶-1(COX1)和血栓素-A2合成酶(Thromboxane-A2 synthase,TXS)的活性,从而减少血栓素-A2(TXA2)的生成。这说明,SVE能介导AA代谢途径抑制血小板聚集。另外,通过计算机对接软件,我们还研究了 SVE中糖醇和单糖分子对COX1的影响。结果显示,糖醇(包括L-赤藓糖醇、L-阿拉伯糖醇、木糖醇和D-山梨糖醇)、单糖(包括D-吡喃葡萄糖、D-呋喃果糖、D-木糖、D-葡萄糖和D-核糖)、乙基葡糖苷和3,4-亚甲二氧基苦杏仁酸都能进入COX1的活性中心,与活性中心的重要氨基酸结合,从而抑制COX1的酶活性。综上所述,以糖醇和单糖为主要成分的SVE对四种主要的血小板聚诱因子诱导的血小板聚集都具有抑制作用,是多位点的血小板聚集抑制剂。SVE抑制血小板聚集的作用机制是通过介导AA代谢途径,抑制其中COX1和TXS的活性。进一步的计算机对接实验发现糖醇和单糖分子能够竞争性的抑制AA代谢过程中COX1的活性,减少血小板聚诱因子TXA2的生成,从而有效的抑制血小板聚集。研究结果充分表明,高粱醋中糖醇和单糖类成分对预防由血小板聚集引起的心血管疾病具有重要意义。