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为了了解BMP-2和IGF-1对成骨细胞的促成骨作用在正常和碘缺乏的大鼠是否存在差异,我们复制了胚胎期和生后发育临界期碘缺乏大鼠模型,把缺碘大鼠子代作为实验动物,从子代1-3天乳鼠的颅骨中分离出成骨细胞进行原代培养。利用来自正常和低碘大鼠颅骨的原代大鼠成骨细胞作为研究对象,分别加入终浓度为0,50,100,200 ng/ml的rhBMP-2和终浓度为0,1,10,100,1000 ng/ml的rhIGF-1,在给药后24,48和72h分别收获细胞提取总RNA,实时荧光定量PCR技术相对定量细胞中OC mRNA水平,动态观察rhBMP-2和rhIGF-1对OC基因表达水平的影响。结果发现:rhBMP-2和rhBMP-2作用时间的不同均导致正常和低碘组大鼠成骨细胞中OC mRNA水平发生改变(P<0.05);rhBMP-2和rhIGF-1作用剂量的不同也会引起两组OC mRNA水平发生不同程度的改变(P<0.05),rhBMP-2在作用于两组细胞48h时以及对正常组作用24h时有显著性差异,rhIGF-1以10 ng/ml剂量时作用最明显;低碘组对rhBMP-2和rhIGF-1作用的反应性均较弱,其OC mRNA水平要低于正常组(P<0.05),两组间的差异在rhBMP-2作用24h和48h时表现明显,而在作用72h时差异不明显,rhIGF-1在作用24h时差别明显。 同时在加入rhBMP-2和rhIGF-1后的24h和48h向细胞中加入MTT,用以检测成骨细胞增殖情况,并收获细胞提取胞浆蛋白,采用连续监测法测定胞浆蛋白中ALP活性。结果发现:随着加入rhBMP-2和rhIGF-1浓度的增加,正常和低碘组大鼠成骨细胞的数量也相应增加(P<0.05),rhBMP-2和rhIGF-1对成骨细胞起到促进增殖的作用;rhBMP-2对正常和低碘组大鼠成骨细胞增殖的影响之间的差别无统计学意义,而rhIGF-1对成骨细胞增殖的影响在正常和低碘组存在显著性差异(P<0.05),低碘组细胞增殖低于正常组,尤其在1000 ng/ml