研究背景冠状动脉旁路移植术(CABG)是目前外科治疗冠心病最有效的手段,全球每年有超过80万例病人进行冠状动脉旁路移植术,对桥血管的需求量非常大。随着冠状动脉旁路移植术的日趋成熟和普及,桥血管移植材料的研究成为人们关注的重要课题。自体血管是目前临床上最为常用和较理想的材料,但来源有限,且常因静脉曲张、畸形、动脉粥样硬化等原因限制其利用,约有30%的患者缺乏可供移植的自体血管。构建组织工程血管是目前解决临床血管移植物短缺的最好方法,但人工血管及非生物体材料的组织工程血管在构建小口径血管方面效果并不理想。全生物化异种移植血管与机体正常血管结构功能相似,有良好的机械性能,可以自我更新；且能够避免排斥反应、降低感染率,有利于提高移植血管的远期通畅率。本研究采用脱细胞及肝素处理的方法在短时间内制备小口径全生物化血管材料,以研究新的移植血管来源。目的探索和评价酶—去污剂法联合肝素结合处理犬颈动脉,以构建小口径全生物化移植血管,从而提供一种新的移植血管来源。方法1.于山西医科大学法医学院实验室取热缺血时间<30min的犬双侧颈动脉,用含抗生素(青霉素钾1000 U/ml)的生理盐水冲洗管腔,再轻柔的剥离其外层的疏松结缔组织,然后将所取的血管截成5cm的长度作为实验材料,放入4℃Hanks液中。实验分3组：新鲜犬颈动脉(A)组、单脱细胞(B)组和肝素结合处理(C)组。2.观测指标：分别取3组的血管标本,分别进行HE、VG染色和电镜观察,对标本的总体形态学及胶原纤维和弹力纤维成分进行组织学评价。应用材料性能试验机测血管标本的的机械性能,取B、C两组标本用甲苯胺蓝(0.05mg/ml)染色观察肝素结合效果和结合程度,并在体外测定两组的凝血时间,以比较结合肝素后的抗凝效果。结果HE染色和VG染色：A组血管壁可见细胞均匀分布,纤维排列致密清晰；B、C两组血管的细胞成分被完全去除,血管支架的细胞外基质成分保留完好,纤维没有发生断裂；与A组相比,B、C两组支架材料的纤维排列较疏松。VG染色结果显示：支架材料的内面可清晰显示完整的内弹性膜结构。扫描电镜观察：A组血管内表面覆盖着完整的单层内皮细胞。经过脱细胞处理后,内皮细胞层被完全去除,无残留任何细胞及细胞碎片成分；内表面弹性蛋白完整、规则,为网状排列,并有规则的孔隙结构；单根纤维无明显的膨胀或断裂。机械性能测试可见3组样本间的拉伸强度、最大载荷、最大变形量、拉伸率、缝线耐受力并无显著差异(P>0.05),仅B、C两组的弹性模量小于A组(P<0.05)。甲苯胺蓝染色：C组管壁全层染色阳性,B组染色呈阴性。凝血时间测定：B组在60min内均有血栓形成；而C组在60min内未形成血栓。结论经酶-去污剂脱细胞后的犬颈总动脉不含细胞成分,细胞外基质保持完好；血管支架的三维结构保持良好；脱细胞前后支架的机械性能无明显改变；肝素覆盖于管壁全层；经肝素处理后的血管标本能够有效的进行抗凝,无血栓形成。符合了移植血管的条件。