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第一部分7,8-二羟基-4-甲基香豆素对HT-22细胞谷氨酸氧化应激损伤的保护及机制研究目的研究7,8-二羟基-4-甲基香豆素(7,8-dihydroxy-4-methylcoumarin,Dhmc)对谷氨酸诱导HT-22细胞氧化应激损伤的神经保护作用,并探讨Dhmc神经保护作用的相关机制。方法将HT-22细胞种板24小时后加入5mmol/L谷氨酸制作神经元损伤模型组,培养基中加入不同浓度的Dhmc与5mmol/L谷氨酸的混合液共同孵育12小时,后在显微镜下分别观察各组神经元形态变化;MTS法检测细胞活力;测定细胞内谷胱甘肽(Glutathione,GSH)含量及活性氧(reactive oxygen species,ROS)活力的变化;细胞染色及Western Blot检测细胞中海马钙结合蛋白(hippocalcin)表达的变化。结果Dhmc能有效地阻止谷氨酸诱导的HT-22细胞死亡(P<0.05),以5mmol/L谷氨酸作用于HT-22细胞12小时后,细胞形态表现为突起减少,应用Dhmc(25μmol/L)后可改善因谷氨酸引起的HT-22细胞形态的改变,并可降低谷氨酸氧化应激损伤后HT-22细胞内ROS的含量(P<0.05)及维持细胞内GSH的含量(P<0.05),并且可阻止细胞内海马钙结合蛋白的减少(P<0.05)。结论Dhmc对谷氨酸诱导的HT-22细胞氧化应激损伤具有神经保护作用。其可能的机制与Dhmc降低细胞内ROS含量、维持GSH含量及阻止海马钙结合蛋白减少有关。第二部分7,8-二羟基-4-甲基香豆素对新生大鼠缺血缺氧损伤的保护及机制研究目的研究7,8-二羟基-4-甲基香豆素(7,8-dihydroxy-4-methylcoumarin,Dhmc)对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤(H/I)的神经保护作用,并探讨Dhmc神经保护作用的相关机制。方法将新生7天大鼠随机分为假手术(Sham)组、Dhmc组、缺氧缺血(hypoxia/ischemia,H/I))组和(Dhmc+H/I)组,建立新生大鼠缺氧缺血(H/I)模型,观察Dhmc的处理对新生大鼠缺血缺氧性脑梗死体积的影响;Western Blot检测脑组织海马钙结合蛋白(hippocalcin)表达的变化。结果与对照组相比,经Dhmc预处理后的新生大鼠的脑梗死体积明显缩小,甚至缺血缺氧4小时后给药仍有保护作用(P<0.05),并且可阻止脑组织内海马钙结合蛋白的减少(P<0.05)。结论Dhmc对新生大鼠脑缺血缺氧损伤具有神经保护作用。其可能的机制与Dhmc阻止海马钙结合蛋白减少有关。实验结果表明Dhmc在体内体外实验均有良好的神经保护作用,是一种有希望向临床转化治疗脑缺血损伤的药物。