发状念珠蓝细菌细胞的优化生长及其活性成分研究

来源 :陕西科技大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:HHP110
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发状念珠蓝细菌又称发菜,是一种生长在干旱、半干旱的荒漠地区的陆生蓝细菌。为了恢复发状念珠蓝细菌有限的生物资源和对其活性成分研究,本文以液态培养的发状念珠蓝细菌为菌源,接种于三种不同的固体基质上培养,通过添加三种不同的亲水性胞外多糖,调节固体基质对水分的润湿情况,使发状念珠蓝细菌能够很好的在固体材料上生长;对液培发状念珠蓝细菌多糖改性工艺、分离纯化和化学结构做了初步研究;发状念珠蓝细菌藻蓝蛋白的提取工艺和酯化后多糖的抗氧化活性也做了相关研究,对发状念珠蓝细菌生物体内产多糖酶做了初步的提取和活性检测研究。主要结果如下:(1)通过添加具有亲水性的果胶、海藻酸钠和阿拉伯胶三种多糖均能提高发菜细胞生物量,其中添加果胶最有利于发菜细胞的生长,海藻酸钠次之,阿拉伯胶的作用最小。另外,多糖的添加量并非越多越好,0.3%的多糖添加量为最宜,超过0.3%后,发菜细胞生物量反而会减少。(2)通过酯化度的测定,确定了发菜多糖的最佳酯化方法(氨基磺酸法)和最合适的溶剂(吡啶),以及发菜胞外多糖酯化的最优工艺条件:时间3h,温度60℃,物料比1:2.5,料液比1:40,发菜荚膜多糖酯化的最优工艺条件:时间2h,温度60℃,物料比1:2.5,料液比1:40。(3)酯化后的多糖通过DEAE-52柱层析和Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱分离纯化,通过紫外光谱和红外光谱分析进一步证明发菜多糖酯化成功;并对酯化后多糖的抗氧化能力进行研究,酯化前后发菜多糖对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基都有清除能力,在一定浓度范围内,发菜多糖对三种自由基的清除效果与多糖浓度成正相关,酯化后多糖的抗氧化能力高于未酯化多糖的。(4)超声波辅助提取法确定发菜藻蓝蛋白的最佳提取工艺条件:液固比172:1(mL:g)、超声功率540W、超声时间11min。(5)对发状念珠蓝细菌生物体内产多糖酶做了初步的提取和活性检测研究,表明发状念珠蓝细菌细胞体内的产多糖酶具有一定的生物活性。
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