桂郁金化学成分及其体外纤溶活性研究

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目的:(1)对桂郁金的化学成分进行研究,从而为揭示其药理作用提供物质基础,并为充分挖掘利用广西道地药材、合理开发利用桂郁金药用资源提供科学的依据。(2)采用正交试验法优选桂郁金中吉玛酮的提取工艺,并建立桂郁金吉玛酮含量测定的方法。(3)采用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)分析比较桂郁金茎叶、生品与炮制品的挥发油化学成分。(4)研究桂郁金的体外纤溶活性。(5)通过单因素考察、正交试验优选桂郁金纤溶活性多糖的提取工艺,并建立其含量测定方法。  方法:(1)用硅胶柱层析和制备HPLC分离桂郁金石油醚和乙酸乙酯部位的化学成分,用现代波谱技术鉴定化学成分的结构。  (2)以吉玛酮为评价指标,采用正交试验法优选桂郁金中吉玛酮的提取工艺,并建立吉玛酮HPLC含量测定方法。  (3)用水蒸气蒸馏法提取桂郁金茎叶、生品与炮制品中的挥发油,并采用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)比较分析。  (4)采用纤维蛋白琼脂平板法,对桂郁金体外纤溶的活性部位进行筛选;用分步沉淀法,考察不同醇沉多糖的纤溶活性。  (5)以料液比、提取时间、提取次数、醇沉时间为考察因素,以多糖提取率为评价指标,采用单因素考察、正交试验优选桂郁金纤溶活性多糖的提取工艺。  结果:(1)从桂郁金的石油醚部位分离得到2个化合物,分别是ComosoneⅡ(I)和Curcuzedoalide(II);从乙酸乙酯部位分离得到2个化合物,分别是邻苯二甲酸二丁酯(III)、β-谷甾醇(IV)。其中化合物Curcuzedoalide也曾从乙酸乙酯部位中分离得到。(2)容县产桂郁金吉玛酮含量最高,而平南产含量最低;桂郁金块根炮制品及桂郁金茎叶中吉玛酮的含量明显低于自然阴干的桂郁金块根。(3)从桂郁金茎叶中分离得到57个化学成分,鉴定了37个,占挥发油总量的69.78%;桂郁金生品中分离出45个化学成分,鉴定了22个,占挥发油总量的68.31%;从桂郁金炮制品中分离出44个化学成分,鉴定了32个,占挥发油总量的79.06%。(4)桂郁金超声水提液、10%和30%乙醇提取液均具有体外纤溶活性,其中以桂郁金超声水提液的纤溶活性最强;分段醇沉结果显示10%至60%醇沉多糖具有纤溶活性。(5)通过单因素考察、正交试验得到桂郁金多糖的最佳提取工艺为料液比为1:25,提取2次,每次20min,醇沉时间为8h。  结论:(1)有3个化合物为首次从该植物中分离得到,为进一步阐明桂郁金药理作用提供物质基础,为充分合理利用和深层次开发桂郁金药材资源提供科学依据。(2)不同产地、不同部位以及不同炮制品的桂郁金吉玛酮含量相差很大。(3)通过GC-MS对桂郁金茎叶、生品与炮制品的挥发性成分进行了比较分析,发现三样品挥发油的成分及含量均存在较大差异。(4)桂郁金的多糖成分具有体外纤溶活性。(5)优选出的桂郁金纤溶活性多糖提取工艺提取率高,稳定、可行;采用蒽酮-硫酸法测定桂郁金多糖含量,该方法准确、简便,具有良好的重复性。
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