利用抑制差减杂交(SSH)技术研究脂多糖诱导的点带石斑鱼功能基因

来源 :海南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jay2048
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究首先以热酚水抽提法提取致病溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)强毒株HN08155和弱毒株HN08152的粗脂多糖(Lipopolysaccharidcs,LPS);以弱毒株HN08152和大肠杆菌(Escherichia coli)LPS作对照,将不同浓度的溶藻弧菌强毒株HN08155粗LPS通过腹腔注射法接种点带石斑鱼(Epinephelus malabaricus),通过测定死亡率和各组石斑鱼血液中白细胞吞噬活性、血清抗菌活性、溶菌活性和酚氧化酶活性等免疫指标,研究该LPS对点带石斑鱼的毒性和免疫保护力。结果表明,溶藻弧菌强毒株和弱毒株粗LPS均对石斑鱼具有比较强的毒性,溶藻弧菌LPS对石斑鱼的免疫保护力随LPS浓度的增高而增强,高纯度的大肠杆菌LPS对石斑鱼的免疫保护效果要优于溶藻弧菌粗LPS。   选用低浓度、高纯度大肠杆菌LPS刺激的石斑鱼头肾细胞cDNA为Tester组,注射PBS的对照组石斑鱼头肾细胞cDNA为Driver组,进行抑制差减杂交(SuppressionSubtraetive Hybridization,SSH),构建cDNA文库。对阳性克隆进行测序并经生物信息学分析,共获得13种不同功能基因的克隆。其中免疫相关功能基因干扰素调节因子-2(irf2)、T-Complex protein 1-theta(tcp-1-theta)、40S核糖体蛋白S8(rpS8)和空泡蛋白分选(vps8)基因共4种;氧运输功能基因血红素-α链(alpha-chain Hb)、血红素-β链(beta-chain Hb)和铁蛋白重链(fhc)3种;转录、翻译调节功能基因有蛋白质翻译延伸延伸因子-2(Eef2)和胶原蛋白C的内肽酶增强子(pcpe)2种;代谢功能基因ct054 1种;其他功能基因有骨髓白细胞分化蛋白家族(Myeloid leukemia differentiation proteinhomologue)基因、斑马鱼基因库中编号为73290基因(zgc:73290)和未命名蛋白基因3种。   本研究首次研究了LPS对点带石斑鱼功能基因的诱导作用,成功获得的干扰素调节因子-2(Interferon regulatory factor-2,IRF2)基因,为阐明LPS的免疫保护作用提供了直接分子证据;本研究的结果还表明,多种氧运输功能基因的表达可能对提高石斑鱼的抗逆性具有重要作用。
其他文献
新媒体时代下的宣传工作是高速公路企业思想政治工作的重要组成部分.卓有成效的宣传工作可以提升高速公路企业形象和行业文化,推动高速公路事业发展.本文论述了新媒体时代做
加强社会组织党建工作,让党建工作成为社会组织的“导航仪”,是扩大党的群众基础、提高党的社会影响力的迫切需要,也是促进社会组织健康发展的有力保障.基于此,本文之中重点
当前我国社会主义事业进入了新时代,这是对我国发展历史方位的最新判断,也意味着我们面临的国际形势、社会发展矛盾、发展目标、实现方式等都产生了深刻的变化.新时代要开创
近年来,随着教育的不断发展,对学生心理的健全、思想的培养逐渐被人们所重视.伴随着市场经济的发展,社会对高素质人才的需求也在增加,因此,高校对综合素质人才的培养任务是十
医院的人事档案是医院档案的重要组成部分,记录了医院工作人员的工作经历、个人表现、业务能力和思想水平,是对医院工作人员履职信息的最基本反映,为医院的人事决策提供了可
近年来,我国的土地供应管理制度越来越完善,在当前背景下对土地测绘提出了较高要求,从而有效控制、运用土地资源.本次研究主要针对地籍测绘、土地储备供应管理二者的关系进行
当前,全球性问题十分普遍,如能源问题,特别是石油资源作为不可再生资源,它的产量多少对人类经济社会的发展有着很大的影响.石油化工行业是利用石油来生产各种工业产品的行业,
人工鱼礁是人们在大海中经过科学选点而设置的构造物,通过为鱼类等水生生物的聚集、索饵、繁殖、生长和避敌提供必要的、安全的场所,以达到改善海域生态环境、保护和增殖渔业资