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目的:视网膜色素变性(RP)是一种较常见的遗传眼病,目前尚无有效的临床治疗手段,因此视网膜疾病相关基因及病理机制的研究对疾病预防、诊断及治疗具有重要意义。REEP6是受体表达增强蛋白(receptor expression enhancing protein,REEPs)家族成员,Reep6基因有两种主要形式的异构体,其差异为是否含有5号外显子。目前已有研究证实Reep6基因突变会导致视网膜变性,而包含5号外显子的异构体Reep6.1在视网膜中特异性表达。因此,本论文通过敲除小鼠Reep6.1基因5号外显子,研究Reep6.1基因在视网膜中的功能和基因突变导致视网膜变性的病理变化过程。最终目的是通过综合分析Reep6.1以及其它已报道的视网膜变性相关基因的功能和作用机制等,阐述视网膜变性的疾病发生过程和发病机制并进一步探索潜在的RP治疗方法。方法:利用CRISPR/Cas9技术构建Reep6.1基因5号外显子敲除小鼠模拟人类视网膜色素变性早期症状;采用视网膜电图(ERG)方法检测视网膜功能;用视网膜冰冻切片免疫荧光染色(IHC)和视网膜蛋白免疫印迹(WB)方法分析敲除小鼠的病理组织改变和光传导蛋白表达情况。最后基于研究结果进行总结分析,阐述Reep6.1基因突变导致视网膜变性病理机制,为相关疾病的深入研究和疾病治疗铺垫基础。结果:Reep6.1基因5号外显子敲除小鼠(KO)视网膜中不表达REEP6.1;REEP6.1的缺失会导致小鼠出现视网膜变性早期症状,视网膜功能受损,光感受器退化,与人类视网膜色素变性症状相似。视网膜切片免疫荧光染色发现KO小鼠光感受器细胞渐进性退化;视网膜蛋白免疫印迹实验发现KO小鼠视网膜中光传导相关蛋白表达异常,视紫红质(RHO)、鸟苷酸环化酶1(GC1)、鸟苷酸环化酶2(GC2)和鸟苷酸环化酶激活蛋白(GCAP2)表达降低;G蛋白偶联受体激酶1(GRK1)和磷酸二酯酶(PDE6b)表达未见显著异常。结论:Reep6.1基因5号外显子的缺失导致视网膜功能异常,光感受器功能障碍,光传导蛋白表达异常。Reep6.1基因5号外显子对维持视网膜稳态,光信号转导有重要意义。