【摘 要】
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2—甲氧雌二醇(2-Methoxyestradiol,简称2-ME)是雌激素的生理性代谢产物,近年来被认为是一种很有希望的抗肿瘤新药,研究表明,2-ME可以诱导一系列尤文氏肉瘤来源的细胞系如EW7
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2—甲氧雌二醇(2-Methoxyestradiol,简称2-ME)是雌激素的生理性代谢产物,近年来被认为是一种很有希望的抗肿瘤新药,研究表明,2-ME可以诱导一系列尤文氏肉瘤来源的细胞系如EW7、SK-N-MC细胞凋亡。核因子κB(Nuclear factor κB,NF-κB)涉及多种信号诱导的细胞凋亡过程。本研究关注NF-κB在2-ME诱导骨尤文氏肉瘤细胞凋亡中的作用,分为两个部分: 第一部分:2-ME诱导骨尤文氏肉瘤细胞凋亡中核因子κB的活性变化 目的:研究2-ME诱导骨尤文氏肉瘤细胞凋亡中核因子κB的活性变化 方法:2-ME诱导SK-N-MC细胞凋亡并以Annexin V-FITC/PI流式细胞术测定凋亡比例。以TNFα为NF-κB阳性刺激剂,检测2-ME对NF-κB激活事件的影响,以荧光素酶报告基因检测NF-κB的转录活性 结果:2-ME可诱导SK-N-MC细胞发生明显凋亡。2-ME抑制TNFα诱导的NF-κB的转录活性 结论:2-ME诱导骨尤文氏肉瘤细胞凋亡中,NF-κB的转录活性被抑制 第二部分:2-ME抑制NF-κB的机制及其在2-ME诱导骨尤文氏肉瘤细胞凋亡中作用 目的:2-ME抑制NF-κB的机制及其在2-ME诱导骨尤文氏肉瘤细胞凋亡中作用 方法:Western Blot分析的IκBα降解,凝胶电泳迁移率变迁分析(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测NF-κB与DNA的结合能力。以抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)干预细胞,探讨2-ME对NF-κB与DNA结合能力的影响与细胞活性氧的关系。以含NF-κB特异序列的双链寡核苷酸作为NF-κB的捕获剂(NF-κB decoy),降低NF-κB与DNA的结合能力,观察这一手段对2-ME诱导细胞凋亡的影
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