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赖氨酸作为肉鸡关键营养素之一,前人的研究主要集中在赖氨酸对常规性能方面影响的评估,而其对肉鸡生长发育、生理机能等方面作用的分子机理尚缺乏深入研究。本试验主要基于micro RNA和circRNA差异表达层面初步探讨赖氨酸调控肉鸡的生长发育和免疫机能的分子机制,为进一步深入揭示赖氨酸作用的分子调控机理提供有益的累积。试验一赖氨酸对肉鸡生长性能、免疫器官发育及免疫相关基因表达的影响为了探究日粮赖氨酸对肉鸡生长发育和免疫的影响。选取一日龄肉鸡雏360只,随机分为3个处理,每处理6个重复,每重复20只鸡雏。3个赖氨酸水平分别为0.60%(LL)、1.00%(ML)、1.40%(HL),赖氨酸适量ML为对照组,赖氨酸缺乏LL或过量HL为试验组,试验期21天。结果显示:1)与ML组相比,LL组的肉鸡平均日采食量、胸肌率、腿肌率、胸腺指数、平均日增重均显著地下降(P<0.05),LL组极显著地增加心脏指数、肌胃指数和料重比(F/G)(P<0.01)。LL组极显著地下调干扰素-γ、TLR4、趋化因子配体12(CXCL12)、白介素-6、白介素-18的m RNA表达量(P<0.01),LL组极显著地上调白介素-13、白介素-4、白介素-10、白介素-12、CXCR4、CATH1和CATH3的m RNA表达量(P<0.01)。2)与ML组相比,HL组肉鸡的平均日增重显著地下降(P<0.05),显著地增加肉鸡的肝脏指数和F/G(P<0.05)。HL组CXCL12、白介素-6、CXCR4、白介素-18、白介素-10的m RNA表达量极显著下调(P<0.01),极显著上调CATH1、CATH3、IFN-γ和TLR4的m RNA表达量(P<0.01)。本试验结果表明,赖氨酸显著影响肉鸡生长发育和免疫,可能通过调控CXCL12及CXCR4、细胞因子、抗菌肽的表达调节肉鸡生长发育和免疫。试验二赖氨酸缺乏肉鸡肝脏组织中差异表达miRNA的鉴定本试验为探究日粮赖氨酸对肉鸡肝脏中miRNA表达谱的影响。选取一日龄肉鸡雏240只,随机分成2个处理,每处理6个重复,每重复20只鸡雏。两个赖氨酸水平分别为0.60%(LD)、1.20%(LA)的日粮,以赖氨酸充足组(LA)为对照组,赖氨酸缺乏组(LD)为试验组,试验期21天。结果表明:1)与LA组相比,LD组肉鸡平均日增重、平均日采食量和胸腺指数显著降低(P<0.05),料重比显著增加(P<0.05),赖氨酸缺乏显著影响肉鸡的生长发育和免疫器官。2)采用Illumina测序,测定LD和LA两组中肝脏样品miRNA表达,利用GO和KEGG对差异表达的miRNA靶基因进行分析。本试验在两组样品中共鉴定了620个miRNA,包括541个已知miRNA和79个新miRNA。与赖氨酸充足组(LA)相比,赖氨酸缺乏组共有220个差异表达的miRNA,其中有130个miRNA上调,有90个miRNA下调。结果表明,与免疫相关的胞浆DNA传感途径,蛋白酶体(免疫蛋白酶体)显著富集(P<0.05)。五条与脂质代谢相关途径显著富集(P<0.05),分别是脂肪酸代谢,萜类骨架的生物合成,2-氧代羧酸代谢,脂肪酸延长,过氧化物酶体(脂肪酸代谢)。四条与氨基酸代谢相关途径显著富集(P<0.05),分别为过氧化物酶体(氨基酸代谢),半胱氨酸和蛋氨酸代谢,氨基酸生物合成和赖氨酸降解。候选靶基因主要参与糖异生过程,糖酵解过程,氨基酸代谢过程、免疫应答调节和脂肪酸分解代谢过程等生物过程。本试验研究结果表明,日粮赖氨酸缺乏会显著影响肉鸡肝脏中miRNA的表达,差异表达的miRNA可调节肉鸡肝脏生长发育和免疫功能。试验三赖氨酸缺乏肉鸡肝脏组织中circRNA的表达变化及其来源基因功能分析利用Illumina测序技术鉴定了赖氨酸充足组(LA)和赖氨酸缺乏组(LD)的circRNA,共检测出77个差异表达的circRNA,包括47个上调的circRNA和30个下调的circRNA。GO分析显示,差异表达的circRNA来源基因显著富集到三个过程470条Go term上,部分Go term与生长发育和免疫密切相关;KEGG分析显示,差异表达的circRNA来源基因富集在生长发育和免疫相关的信号通路。分析结果表明,日粮赖氨酸缺乏显著影响circRNA来源基因的表达,参与肉鸡生长发育过程和免疫反应。