十余年来，国外泌尿系组织工程研究已取得了很大进展，科研人员已成功地应用组织工程化人造泌尿系组织修复和重建了动物缺损的膀胱、输尿管。而国内组织工程研究主要集中于软骨、肌腱等方面的研究，尚未见到膀胱组织工程研究的相关报道。本研究应用国产支架材料，采用组织工程技术对人工膀胱组织的构建培育进行了初步实验研究，实验主要包括以下三个部分：1.国产聚乙交酯丙交酯泡沫材料(PLGA)的生物相容性的实验研究。2.膀胱组织工程种子细胞的实验研究。3.采用组织工程技术建造生物性人工膀胱组织的实验研究。研究结果简述如下：第一部分 国产聚乙交酯-丙交酯泡沫材料的细胞毒性、组织相容性及降解率的测试与评价实验。结果显示国产PLGA支架材料对细胞的生长增殖影响小，其细胞毒性小，植入体内后无明显的炎症反应和异物反应，且随植入时间的延长而逐渐降解。实验表明PLGA具有较好的生物相容性，从而可作为膀胱组织工程研究的细胞支架材料。第二部分 膀胱移形上皮细胞与平滑肌细胞的分离培养、鉴定、生物学特性、及大量扩增的实验研究。在无菌条件下切取兔膀胱，机械分离膀胱移形上皮层与平滑肌层并剪碎。应用胰酶(0.125%)和EDTA(0.02%)混合消化移形上皮组织小块，之后收集移形上皮细胞采用添加附加成分的角阮细胞培养基进行培养, 结果表明此法培养的移形上皮细胞稳定生长期相对较长，细胞在第2-6代的生长特性相似，可以进行传代扩增。应用0.2%的II型胶原酶消化平滑肌组织小块，获取的平滑肌细胞采用含10%胎牛血清的DMEM培养基进行培养，细胞长满后进行传代培养。将传代的平滑肌细胞通过微载体培养技术在旋转生物反应器(RCCS)内进行培养扩增。实验结果表明在旋转生物反应系统中利用微载体培养技术能够在短时间内获取<WP=9>大量活性良好的平滑肌细胞。与常规培养条件相比，旋转生物反应器内微载体培养法更适宜于平滑肌细胞的大规模培养与扩增。第三部分 细胞与材料复合体的构建和培育实验。首先将培养扩增后的膀胱移形上皮细胞、平滑肌细胞制为细胞悬液，将它们分别接种到预制为囊样形状支架材料的内外表面，形成细胞材料复合体。复合体在37℃孵箱培育1-4天后将其植入到裸鼠背部皮下培育，术后定期取材，对标本进行大体观察、组织学检查、免疫组化染色及Western blot检测角蛋白。结果表明，经过体内培育20天、40天、60天的细胞-材料复合体，在外观上形成了与支架材料形状基本一致的新生组织，在应用各种检测手段检查后证明，所培育的新生组织的外壁由多层的平滑肌细胞构成，内壁由数层移形上皮细胞构成，其在组织结构上类似于正常膀胱壁, 且再生的上皮细胞中仍富含有40KD的角蛋白。本实验对国产PLGA生物学特性的检测实验表明其作为膀胱组织工程研究的支架材料具有一定的可行性。本实验还摸索了膀胱移形上皮细胞与平滑肌细胞的培养与扩增条件,再将培养扩增后的种子细胞接种到支架材料的内外表面,形成细胞材料复合体。经体内培育，实验结果表明细胞材料复合体可培育为类似于正常膀胱壁组织结构的新生组织,这进一步表明国产PLGA支架材料可作为膀胱组织工程研究的细胞支架材料。