论文部分内容阅读
探讨鹅生长及体内脂肪沉积的分子遗传机理,进一步提高鹅的生长速度及改善肉的品质,以满足加工业和消费者的需求具有重要的理论和现实意义。生长激素是一种具有广泛生理功能的生长调节素,通过刺激骨、软骨细胞的生长和分化,调节蛋白质、糖及脂肪的代谢而促进机体生长发育。脂肪型脂肪酸结合蛋白参与细胞内脂肪酸的运输,可将脂肪酸从细胞膜上运送到脂肪酸氧化和甘油三酯及磷脂的合成位置,在脂肪酸代谢中起着重要的作用。本项研究的主要目标是将生长激素基因和脂肪型脂肪酸结合蛋白基因作为影响鹅生长和脂肪性状的候选基因,克隆这两个基因、分析基因的组织特异性表达规律并研究基因变异与生长和体组成性状表型之间关系。为实现上述目标,本项研究采用RT-PCR方法克隆鹅GH基因和鹅A-FABP基因;采用RT-PCR方法、Northern-Blot方法检测GH基因和A-FABP基因在鹅心脏、肝脏、肺脏、胃、脾脏、肾、小肠、下丘脑、垂体、肌肉、脂肪和睾丸组织中的表达情况;利用PCR-SSCP和直接测序的方法检测GH基因的SNPs并进行SNPs的群体遗传学分析;针对不同的研究群体(莱茵鹅和黑龙江籽鹅)的特点,建立合适的统计分析模型,进行GH基因型与生长和体组成性状的相关分析。主要研究结果如下: (1)克隆了鹅GH基因编码区、3’非翻译区和内含子2。鹅GH基因编码区长度为651bp。有关序列已递交给GenBank,检索号为AF149895和AF490903。 (2)在鹅GH基因内含子2中发现了2个点突变,分别为C441A和T449C突变(Accession No.AF490903)。 (3)GH基因内含子2中的2个突变位点在莱茵鹅和黑龙江籽鹅中的群体遗传学分析结果表明,等位基因型频率和基因频率在莱茵鹅和黑龙江籽鹅间的分布有极显著差异(P<0.01)。 (4)不同群体中GH基因内含子2的SNPs与生长和体组成性状的相关分析表明,在莱茵鹅中这两个多态性位点所产生的6种基因型个体间体重差异显著(P<0.05),BB基因型个体最重,显著高于其它基因型个体,CC基因型个体体重显著小于其它基因型个体。在黑龙江籽鹅中这两个多态性位点所产生的4种基因型个体间心脏重差异显著(P<0.05),AC基因型个体心脏最重,显著高于其它基因型个体。 (5)RT-PCR和Northern杂交的结果都表明,鹅的GH基因只在下丘脑和垂体中表达。 (6)克隆了鹅A-FABP基因编码区和内含子2。鹅A-FABP基因编码区长度为399bp。有关序列已递交给GenBank,检索号为AF472610和AF442493。 (7)用RT-PCR方法进行组织表达分析,发现鹅A-FABP基因在脂肪、心和肾中表达量较高,在心、肝、肺、下丘脑、胃、肌肉、垂体和睾丸中微量表达,而在脾和小肠中不表达。