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脆性X综合征（fragile X syndrome，FXS）是常见的遗传性智力低下疾病之一，99%的患者是由FMR1（智力低下基因1）的5’端非编码区的CGG三核苷酸重复序列异常扩增或其上游的CpG岛过度甲基化引起的FMR1的表达产物FMRP（fragile X mental retardation protein，智力低下蛋白）表达下降或缺失所致。定位于3q28的智力低下相关基因FXR1与FMR1属同一基因家族，编码的蛋白质都具有与蛋白质和RNA结合特性。本课题在本实验室前期工作已证明FXR1P与CMAS相互作用的基础上，进一步研究FXR1P与CMAS相互作用后的生物学效应。目的：研究FXR1P与CMAS相互作用后的生物学效应，为阐明FXR1的基因功能提供实验依据。方法：1. PCR扩增FXR1基因，将其连接到pcDNA3.1(-)载体上，构建pcDNA3.1(-)/FXR1重组载体，并进行酶切鉴定和测序分析。2.通过Lipofectamine2000转染pcDNA3.1(-)/FXR1重组载体至大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞和大鼠血管平滑肌细胞VSMC细胞，并通过western blot实验检测转染效率。3. pcDNA3.1(-)/FXR1重组载体转染PC12细胞和VSMC细胞后，观察细胞形态的变化，使用大鼠抗神经节苷脂抗体（GM1）ELISA检测试剂盒检测FXR1过表达引起的神经节苷脂浓度的变化，超微量ATP酶测试盒检测Na+-K+~ATP酶、Ca2+-Mg2+~ATP酶活力的变化，流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡情况。结果：1.酶切鉴定和测序分析显示pcDNA3.1(-)/FXR1重组载体构建成功。2. pcDNA3.1(-)/FXR1重组载体成功转染至PC12细胞和VSMC细胞，使FXR1在PC12细胞和VSMC细胞中过表达。3. FXR1的过表达不影响PC12细胞的形态，而FXR1过表达的VSMC细胞呈不规则形；FXR1过表达能显著提高PC12细胞GM1的浓度，而不影响VSMC细胞GM1的浓度；并显著提高PC12细胞Na+-K+~ATP酶和Ca2+-Mg2+~ATP酶的活性，而不影响VSMC细胞Na+-K+~ATP酶和Ca2+-Mg2+~ATP酶的活性；可以显著降低PC12细胞的凋亡率，而不影响VSMC细胞的凋亡率。结论：1. FXR1基因的过表达可能通过提高PC12细胞中与其相互作用的CMAS的活性，进而提高细胞中GM1的浓度，对PC12细胞的生长产生保护作用。2. FXR1P调节GM1的浓度具有组织特异性，PC12细胞是其效应细胞之一，在VSMC细胞中未呈现这种调节作用。