CABYR在乳腺癌中的异常表达与基因突变位点的研究及其临床意义

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目的   通过检测酪氨酸磷酸化调节基因(CABYR)在乳腺癌及正常乳腺组织中的表达差异及其基因突变情况,进一步探讨乳腺癌组织中CABYR基因的异常表达情况和突变位点及其临床意义。   方法:   应用免疫组化S-P法检测103例乳腺浸润性导管癌,62例乳腺良性疾病患者的正常乳腺组织的石蜡切片中CABYR蛋白的表达情况;应用PCR联合基因测序法检测两组新鲜冰冻组织中CABYR基因的突变情况。103例乳腺浸润性导管癌中均为女性,平均年龄50岁(32-69),中位年龄51岁;按组织分级分为:Ⅰ级16例,Ⅱ级56例,Ⅲ级31例;按绝经前后分为:绝经前71例,绝经后32例。采用t检验分析乳腺癌组和正常乳腺组之间CABYR蛋白表达的差异情况以及基因突变组和非突变组之间蛋白表达的差异情况;应用有序分组资料线性趋势检验分析CABYR蛋白表达强度同组织学分级之间的关系;应用Spearman相关分析及多元线性回归分析法分析肿瘤大小、Ki-67分值、淋巴结转移个数,发病年龄与CABYR蛋白表达之间的相关性;采用X2检验分析乳腺癌组和正常乳腺组CABYR基因突变的差异及绝经前组同绝经后组之间突变率的差异。检验水准定于P<0.05。所有标本均经经验丰富的病理科医师证实。   结果:   1、免疫组织化学染色结果   (1)CABYR蛋白在乳腺癌组光密度值67.4583±36.4174,正常乳腺组光密度值23.7970±13.0151。经统计学分析(Levenes Test,p<0.05,两样本方差不齐;采用两独立样本近似t检验,p<0.05)发现乳腺癌组CABYR蛋白表达高于正常乳腺组,差异有统计学意义(P<0.05)。   (2)通过有序分组资料的线性趋势检验分析发现:CABYR蛋白的表达随着乳腺癌组织学分级的增高而增高,有统计学意义(线性回归分量X2=6.357,自由度=1,查X2界值表P<0.05)。   (3)乳腺癌组CABYR蛋白表达与肿瘤大小、Ki-67分值、淋巴结转移个数、发病年龄的Spearman相关分析发现:1)肿瘤大小与CABYR蛋白的表达之间无明显相关性(r=0.003,p<0.05);2)Ki-67分值与CABYR蛋白的表达之间呈正相关(r=0.813,p<0.01)具有统计学意义;3)淋巴结转移个数与CABYR蛋白的表达之间无明显相关性(r=-0.013,p<0.05);4)乳腺癌患者年龄与CABYR蛋白的表达之间呈负相关(r=-0.702,p<0.01)具有统计学意义。通过多元线性回归再次验证: Ki-67分值同CABYR蛋白的表达呈正相关(标准回归系数=0.699,P≤0.05)且发病年龄同CABYR蛋白的表达呈负相关具有统计学意义(标准回归系数=-0.047,P≤0.05)。   2、PCR联合基因序列测定结果   (1)发现CABYR基因点突变(第4外显子3’端内含子10375位G>A)。乳腺癌组突变率高于正常乳腺组;乳腺癌中CABYR突变率12.62%,正常乳腺组CABYR突变率1.61%,差异有统计学意义(X2=6.04,自由度=1,查X2界值表得,X2=6.04>3.84, P<0.05)。   (2) CABYR基因在绝经前和绝经后乳腺癌患者中无显著差异(X2=2.09,自由度=1,查X2界值表得,X2=2.09>3.84,P>0.05)。   (3)基因突变组CABYR蛋白的表达高于非突变组,差异有统计学意义(t=4.485,P<0.05)。   结论:   1、乳腺癌组织中CABYR蛋白表达异常增高,并且其增高提示着更早的发病和更差的预后。   2、发现CABYR基因点突变(第4外显子3’端内含子10375位G>A);乳腺癌组突变率明显高于正常乳腺组织;提示该点突变对CABYR蛋白的表达具有增强作用。
其他文献
采用高效液相色谱法,以甲醇+乙腈+水为流动相,使用C18为填充物,4.6 mm×250 mm/5 μm的不锈钢柱和Waters 2489 UV-Vis检测器,在225 nm波长下对30%咪鲜胺·氟环唑微乳剂进行分