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第一部分ATRX蛋白表达与神经母细胞瘤预后的影响背景和目的神经母细胞瘤(Neuroblastoma,NB或NBL),是一组临床表现及预后差异范围极大的疾病,从肿瘤浸润、播散、转移到死亡,或者肿瘤发展成熟分化为良性的节细胞神经瘤或自发消退等临床转归。1981年发现ATRX基因,于2014年ATRX蛋白入选为中枢神经系统肿瘤的标志物之一。因从分子水平探索神经母细胞瘤的发生发展以及转归,已成为目前神经母细胞瘤研究的共识,因此本实验将通过检测肿瘤病变组织中ATRX蛋白的表达情况,探讨其对NB患儿生存预后的影响。材料与方法选择2016.01.01至2019.08.31期间至郑州大学第一附属医院小儿外科就诊的神经母细胞瘤患儿作为研究对象,研究截止时间为2020.02.29,共搜集神经母细胞瘤(NB)患儿29例、节细胞神经母细胞瘤(GNB)10例、节细胞神经瘤(GN)10例(作为对照),制作组织芯片及切片,进行HE染色及免疫组化(IHC)操作,通过Image J软件中的IHC Tool Box工具统计所有切片高倍镜下单位面积ATRX蛋白在细胞核中染色数量,结合长期随访的生存情况,运用Kaplan-Meier法和Log-rank检验ATRX基因表达情况对NB患儿预后的影响。结果1.ATRX蛋白在NB、GNB、GN中表达水平的差异有统计学意义,其中ATRX蛋白在NB中较GNB、GN中低表达。2.ATRX蛋白在NB+GNB和GN组中表达水平的差异无统计学意义。3.ATRX蛋白在不同危险分层中表达水平的差异无统计学意义,且与危险分层无关联。4.ATRX蛋白的表达差异对NB患儿的预后影响无统计学意义。5.ATRX蛋白的表达差异与NB患儿的确诊时间存在相关性,与MYCN基因有无扩增无关。结论ATRX蛋白表达水平与NB患儿的确诊时间有关,其表达缺失预示NB预后不良。第二部分不同临床指标与神经母细胞瘤预后的相关分析背景和目的NB是源自神经嵴的胚胎性肿瘤,是儿童最常见的颅外实体性肿瘤之一,其最显著的特点是临床生物学行为变化范围大。目前临床上采用的分期系统有国际神经母细胞瘤分期系统即INSS和国际神经母细胞瘤危险因素协作组提出的术前分期系统即INRGSS,还有以其各自为基础的风险分层,分析NB不同分期及其危险分层对患儿预后评估的效果,明确不同因素对NB预后评估的临床价值,并进一步探讨可能存在的独立影响预后的因子对NB患者预后的影响。方法回顾性分析32例NB患儿临床病例及病理免疫组化资料,随访长期生存情况,运用Kaplan-Meier法和Log-rank检验不同临床指标对NB患儿预后生存的影响,运用Cox回归并尝试拟合比例风险模型研究不同因素对NB预后的影响。结果1.目前随访NB预后情况的患儿共32例,失访9例(28.1%),死亡8例(25%),存活15例(46.9%)。总体平均无瘤生存时间(27.58±2.23)月,总体无瘤中位生存期27.60月,总体生存率(OS)75%。2.总结分析年龄、术前有无化疗、NSE水平、NB患儿病理切片免疫组化结果中的突触素Syn、神经黏附分子CD56(NACM)、CD99、Ki67的表达与否、MYCN基因有无扩增及Shimanda病理分型对NB患儿预后的影响,以Kaplan-Meier法及Log-rank检验统计分析比较上述因素对NB患儿预后的影响,除年龄外其余各因素均无统计学意义。但降低数据等级进行统计学差异性比较,其中PCD56=0.036<0.05,有统计学意义,即CD56表达与否,NB患儿的预后可能不同。3.分别比较INSS、INRGSS、INSS危险分层、INRGSS危险分层对NB患儿预后评估的差异性,当α取0.05时,INSS、INRGSS、INSS危险分层、INRGSS危险分层对NB患儿预后的评估均无统计学意义;当α取0.1时,INRGSS对NB患儿预后评估有统计学意义。4.比较INSS Ⅳ期和INRGSS M期NB患儿预后生存时间的差异,无统计学意义(Log-rank χ2=0.805,P=0.370,α=0.05)。5.比较INSS和INRGSS对高危组NB患儿预后评估的差异,无统计学意义(Log-rank χ2=0.133,P=0.715)。6.比较INSS危险分层和INRGSS危险分层对NB患儿预后评估的差异,作Log-rank检验,P>0.05,无统计学意义。7.通过Cox单因素生存分析筛选变量,拟构建比例风险模型,当分别以INSS危险分级、INRGSS危险分级作为分层变量时,MYCN基因扩增对NB患儿的预后进行Cox回归分层分析时,本研究病例PINss=0.13 1,PINRG=0.291,α=0.05,无统计学意义,但以bootstrap键进行大样本分层抽样分析后,PINSS=PINRG=0.055,α=0.1,有统计学意义,即在总体或大样本量的人群中,INSS危险分层和INRGSS危险分层会在MYCN基因状态评估NB患儿预后中产生影响。8.MYCN基因扩增是NB患儿生存的危险因素,根据βCD56<0,RR<1,推测CD56可能是NB患儿生存的保护因素。结论1.CD56可能是NB患儿生存的保护因素。2.INRGSS评估NB患儿预后的准确性有差异。