在生物体内,蛋白质是必不可少的生命物质,是靶向药物的重要靶点之一。研究药物与蛋白的结合特性,有助于了解药物在体内的运输和分布情况,这在临床治疗以及药物的药效学和药动学研究中都是非常重要的,可以有效地指导临床合理用药。手性药物的分子结构中存在手性因素,当其吸收进入血液后,血浆蛋白与手性药物之间存在着识别、容纳和相互作用的过程,从而引起手性药物的不同对映体之间药效学和药动学的差异。因此,蛋白结合的立体选择性研究对手性药物的开发及临床应用的安全性是必要的。本课题利用立体选择性的手性分离与定量方法,研究了手性药物对映体与血浆蛋白结合的立体选择性,为理解手性药物对映体的蛋白结合机制,探讨蛋白结合引起的药效差异和代谢行为的立体选择性的机理提供理论依据。 一、美西律与血浆蛋白结合的立体选择性研究 以2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖异硫氰酸酯（GITC）为手性衍生化试剂,建立了柱前衍生化RP-HPLC法测定美西律对映体的方法,通过衍生化试剂和衍生化反应时间的考察,优化了衍生化反应条件。该方法在0.05-40.0μg·mL^-1浓度范围内线性关系良好,不同体系中的提取回收率均大于81%,日内精密度和日间精密度均小于14%,可用于美西律与蛋白结合的立体选择性研究。实验采用超滤法系统地研究了美西律对映体与人血浆蛋白、血清白蛋白和α₁-酸性糖蛋白的结合及其立体选择性。美西律与血浆蛋白中等结合,R-对映体的结合能力强于S-对映体。通过研究不同个体间的血浆蛋白结合,发现血浆蛋白结合率存在显著的个体差异,其中个体2的蛋白结合率较高,R-,S-对映体的平均结合率分别为76.5%,73.6%,而与个体1的平均蛋白结合率分别为49.7%,38.8%。通过分别研究美西律与人血清白蛋白和α₁-酸性糖蛋白的作用,发现对映体结合的立