参考天冠集团真空抽酒生产线,自制一个乙醇发酵与真空分离小型反应器,在此基础上,研究了适用于反应器的培养基条件,抽酒工艺参数,负压对酵母生理生化的影响;针对生产线抽酒过程中酸度会升高的问题,对杂菌进行了好氧、厌氧平板观察和变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析。主要结论如下:(1)适用于设备参数和工艺参数的发酵培养基条件:水:玉米:木薯=4:1:1,种子液浓度为1g干酵母/100水,接种量10%。这样的培养基条件可以保证酒度较高的前提下物料不会阻塞设备管道,且发酵结束时残总糖较低。(2)最佳抽酒工艺条件:10°左右的酒度开始抽,抽酒压力为5kpa个大气压,抽酒温度40℃,抽酒过程中补料对发酵有促进作用;温度、乙醇、压力对发酵影响的试验结果证明了这一工艺条件的正确性。(3)通过平板和显微观察,发现负压对酵母活性、形态有影响;负压对发酵性能影响的试验中,抽酒减少了酒精抑制,增加了耗糖速度,抽样乙醇产量、产率、得率分别是74.72g/L、1.067g/(L.h)、0.372g/g,对照乙醇产量、产率、得率分别是74.4g/L、1.06g/(L.h)、0.377g/g;抽压过程中甘油以及和能量代谢相关的副产物增加,发现有一部分糖消耗掉转化为菌体的维持能,用excel中的规划求解工具计算出的代谢流分布结果与此一致;根据发酵结果,对菌体生长,糖消耗,co2生成,乙醇生成进行了曲线拟合。(4)好氧,厌氧平板观察都发现有杂菌菌落;结合取样时生产化验数据,DGGE分析得出酸度高可能和b、c、e条带所代表的菌有关。