目的:研究隐睾下降固定术后eNOS和iNOS的表达及NOS抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对隐睾下降固定术后生精细胞凋亡的影响。方法:75只健康雄性SD大鼠(22 day-old)随机分为隐睾组(60只)和假手术组(15只)。建立单侧隐睾模型,模型建立按文献操作[1] :戊巴比妥钠(40mg/Kg)腹腔内注射麻醉,下腹正中切口,隐睾组大鼠切断右侧睾丸引带,用7-0无创伤线将右侧睾丸固定于腹后壁关腹,假手术组右侧睾丸切断引带后还纳入阴囊关腹。术后12天将隐睾组大鼠随机分为隐睾组(不作处理)、隐睾固定组、隐睾固定+生理盐水组、隐睾固定+L-NAME组,每组15只大鼠。隐睾下降固定模型建立按文献操作[2] :戊巴比妥钠(40mg/Kg)腹腔内注射麻醉,下腹正中切口和阴囊横行切口,将睾丸游离后还至阴囊,用7-0无创伤线将睾丸固定于阴囊肉膜上。术后分别于腹腔内注射生理盐水或L-NAME,每天一次,定时定量(50mg/Kg)。假手术组将右侧睾丸牵拉入腹腔再还至阴囊。术后第12天于腹腔内给药后2小时大鼠尾部采血,取血清于-80℃冻存,硝酸还原酶法测定血清NO含量,化学比色法测血清NOS活性。术后第24天脱颈椎处死大鼠,留取各组大鼠双侧睾丸称湿重,常规组织学切片观察各组右侧睾丸生精上皮形态,TUNEL原位末端标记法结合流式细胞术(FCM)检测各组右侧睾丸生精细胞凋亡,Western blot和免疫组化分别检测eNOS、iNOS蛋白表达的变化。结果:各组大鼠左侧睾丸及假手术组右侧与左侧睾丸之间重量无明显差异,其余各组右侧睾丸重量均轻于左侧睾丸;隐睾组右侧睾丸重量明显轻于其它各组右侧睾丸;隐睾固定+L-NAME组右侧睾丸重量大于隐睾固定组、隐睾固定+生理盐水组及隐睾组右侧睾丸。隐睾固定组、隐睾固定+生理盐水组之间各检测指标无显著性差别。隐睾组血清NO含量和NOS活性均高于其它各组,隐睾固定组和隐睾固定+生理盐水组血清NO含量和NOS活性高于假手术组和隐睾固定+L-NAME组。亚倍体生精细胞百分比和凋亡指数在隐睾组最高,隐睾固定组及隐睾固定+生理盐水组次之,隐睾固定+L-NAME组更低,假手术组最低,差别均有显著性意义。Western blot显示假手术组睾丸eNOS和iNOS蛋白含量最低,隐睾固定和隐睾固定+生理盐水组与隐睾固定+L-NAME组差别无显著性意义。免疫组化显示假手术组睾丸生精上皮内有eNOS和iNOS弱表达,其余各组隐睾固定侧生精上皮内均有较强的eNOS和iNOS表达,间质有较强的eNOS和iNOS表达,而血管只有eNOS的强表达。结论: 1.隐睾下降固定术后睾丸生精功能的改善与生精细胞调亡减少有关。2. NO是隐睾下降固定后生精细胞仍然过度凋亡的重要生物活性因子。3. L-NAME降低隐睾下降固定后NO的产生,减少生精细胞凋亡,提示NOS抑制剂能促进隐睾下降固定术后的睾丸提高生精能力。