论文部分内容阅读
目的：蒿甲醚是青蒿素的衍生物之一,是抗疟药物,近年来的研究显示,蒿甲醚有抗肿瘤作用。本课题旨在探讨蒿甲谜(artemether,ART)对人舌鳞癌Tca8113细胞的生长抑制和凋亡诱导作用及可能机制。方法：1人舌鳞癌Tca8113细胞株购于南京凯基生物科技有限公司,进行实验。2实验分组：分为正常对照组、不同浓度蒿甲醚药物浓度组。正常对照组用10%FBS的1640培养液培养舌鳞癌细胞；蒿甲醚组分别用10%FBS的1640培养液配制成的终浓度为100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml的蒿甲醚处理细胞。3采用四唑盐比色(MTT)方法,观察蒿甲醚作用的人舌鳞癌细胞增殖活性的影响。4采用流式细胞技术观察蒿甲醚作用的人舌鳞癌细胞的细胞早期凋亡的影响。5采用流式细胞技术观察蒿甲醚作用的人舌鳞癌细胞的细胞凋亡(亚倍体峰)的影响。6采用免疫细胞化学法观察蒿甲醚作用的人舌鳞癌细胞Survivin蛋白的表达情况。7采用蛋白印迹(Western-blot)技术检测人舌鳞癌细胞Survivin蛋白的表达情况。8数据处理采用SPSS11.5统计学软件进行,采用单因素方差分析和LSD-t检验,P<0.05和P<0.01表示差异有统计学意义。结果：1蒿甲醚对舌鳞癌细胞增殖活性的影响。100μg/ml、200μg/ml和300μg/m1浓度的ART分别处理24h、48h和72h后,舌鳞癌细胞的生长受到明显的抑制,呈现时间依赖性和剂量依赖性,经过统计学分析,各组之间差异均具有统计学意义(P<0.05)。2蒿甲醚对舌鳞癌细胞早期凋亡(AnnexinV)的影响。100μg/ml、200μg/ml和300μg/ml浓度的蒿甲醚作用于舌鳞癌细胞48h,经流式细胞仪检测,其早期凋亡率与对照组比较逐渐增加,但是其中100μg/ml和200μg/ml组比较,差异无统计学意义(P>0.05),其它各组差异具有统计学意义(P<0.05)。3蒿甲醚对舌鳞癌细胞凋亡(亚倍体峰)的影响。100μg/ml、200μg/ml和300μg/ml浓度的蒿甲醚作用于舌鳞癌细胞48h,经流式细胞仪检测,其凋亡率(亚倍体峰)与对照组比较逐渐增加,但是其中对照组和100μg/ml组、100μg/ml和200μg/ml组比较差别无统计学意义(P>0.05),其它各组差别具有统计学意义(P<0.05)。4蒿甲醚对舌鳞癌细胞中Survivin的表达的影响。100ng/ml、200μg/ml、300μg/ml ART作用于Tca8113细胞48h后,采用免疫细胞化学染色,显微镜下观察细胞胞浆着的棕黄色逐渐减弱而对照组细胞浆着色很深,胞浆呈现清晰的棕黄色,经过统计学分析,各组之间差异具有统计学意义(P<0.05)。5Survivin蛋白表达的结果Western-Blot检测显示：对照组和100μg/ml、200μg/ml的ART作用于Tca8113细胞48h后,Survivin蛋白的表达依次递减,经过统计学分析,各组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)结论：蒿甲醚对舌鳞癌细胞的生长有抑制作用且对其具有凋亡诱导作用,其作用机制可能与肿瘤细胞Survivin蛋白表达的下调有关。