BPI蛋白在雄性小鼠生殖系统的表达特性及其在精卵融合过程中的功能

来源 :上海交通大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhouyiai1015
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杀菌渗透增强蛋白(Bactericidal permeability increasing protein,BPI)是一种有很强抗革兰阴性菌(GNB)活性的阳离子蛋白,具有防御感染的作用。BPI最早从人中性粒细胞的嗜苯胺蓝颗粒分离。BPI抑制或者杀死革兰阴性菌主要通过以下两条途径:(1)与细菌细胞壁上脂多糖的脂质A特异结合,从而改变细胞壁的通透性;(2)中和细菌内毒素。在正常情况下,小鼠睾丸与附睾被检测到高水平的BPI表达,提示BPI除了抗菌作用外,亦有可能在生殖活动中扮演某种角色。本研究旨在揭示BPI在小鼠睾丸与附睾的表达特性。利用制备的抗BPI-C多克隆抗体,重点观察BPI在附睾表达的区域特异性。在了解BPI表达规律的基础上,进一步探讨其表达的调控机制,及其在生殖活动中的可能作用。  首先,RT-PCR发现BPI的 mRNA在小鼠睾丸与附睾呈高水平表达,并且,BPI的转录子(transcripts)在附睾中只表达于附睾头部,而在前列腺、精囊腺和凝固腺未见表达。其次,我们经原核重组表达、亲和层析纯化了BPI-C端蛋白,并获得抗BPI-C兔多克隆抗体。以该抗体为一抗,经免疫免疫荧光化学法染色后发现,BPI表达在睾丸晚期生精细胞、精子、间质细胞(Leydig cells)、附睾头部上皮及管腔、睾丸输出小管,并可附着在附睾精子头部顶体区质膜及顶体内。雄激素调控BPI表达的体内、外实验结果显示,BPI的转录与翻译表达水平都与雄激素具有显著相关性。最后,我们进行了小鼠体外穿卵实验,结果提示小鼠精子顶体内的BPI可能直接或间接参与了精卵融合。以上研究结果为阐明BPI在男性生殖与精卵融合中所起的作用提供了一定的理论基础。
其他文献
研究目的:SND1,因为分子量为100kDa,所以又称为p100蛋白或Tudor-SN蛋白。人类SND1最初被发现是作为转录共激活因子能够激活EB病毒细胞核抗原2(Epstein-Barr virus nuclear pr