异常轻链对杂交瘤细胞功能性轻链转录分泌的影响及抗CEA单链抗体—链亲和素融合基因的克隆表达

来源 :第四军医大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:yangyahui00
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1975年Kohler和Milstein将分泌抗体的脾脏细胞和骨髓瘤细胞进行融合,建立了杂交瘤技术。目前多数骨髓瘤细胞系来源于MOPC-21细胞,而且含有两种k轻链转录子,即正常(功能性)和异常轻链转录子。这种异常轻链是指在VJ重排时发生移位,引起错误,形成终止码。已有研究证实,这种异常轻链在细胞水平的表达可超过功能性轻链的表达,利用PCR经cDNA中获得的轻链可变区基因主要是这种异常轻链。但尚不清楚,这种异常轻链如何影响功能性轻链的转录及抗体分子的分泌,即这种异常轻链的非均衡性表达是否影响到杂交瘤细胞抗体分子的分泌功能。本研究论文第一部分选择了经与SP2/0融合来源的两株杂交瘤细胞系,抗CEA和抗AFP,探讨了异常轻链对这两株细胞系功能性轻链转录及对杂交瘤抗体分子分泌功能的影响。以这种异常轻链为标记探针,Northern blot结果表明,抗AFP和CEA杂交瘤细胞中均有较高水平的异常轻链表达,在获得了上述两种杂交瘤功能性轻链可变区克隆的基础上,分别以功能性轻链作为探针时发现,CEA杂交瘤中几乎未见到有正常
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