仙茅多糖对RAW264.7细胞功能活化以及部分模式识别受体蛋白表达的影响

来源 :贵阳中医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dg9902
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目的:探索仙茅多糖(COP)对RAW264.7细胞功能活化以及部分模式识别受体蛋白表达的影响。  方法:  1.通过MTT实验方法检测COP对RAW264.7细胞的毒性作用;  2.通过ELISA法和Griess法分别检测COP对RAW264.7细胞培养36h后产生TNF-α与NO的影响;  3.采用RT-PCR检测COP对RAW264.7细胞表达iNOS mRNA和TNF-αmRNA分子的影响;  4.运用Western Blotting法检测COP对RAW264.7细胞膜表面TLR4、TLR2、MR和Dectin-1受体蛋白表达的影响。  结果:  1.MTT结果显示,在一定浓度下,COP对RAW264.7细胞无毒性作用;  2.COP高剂量组TNF-α的分泌量显著升高(P<0.05);COP高、中剂量组NO的释放量显著升高(P<0.01);  3.RT-PCR结果显示,COP组均能明显刺激RAW264.7细胞中TNF-αmRNA和iNOS mRNA分子的表达,且呈剂量依赖性;  4.WB结果显示,COP在不同浓度下可不同程度地刺激TLR4、TLR2、MR和Dectin-1这四类细胞膜受体蛋白的表达,但不同受体对药物浓度的敏感性不一致。  结论:  COP可促进RAW264.7细胞TNF-αmRNA和iNOS mRNA的转录,从而诱导细胞分泌TNF-a和NO,发挥免疫调节活性;其机制可能与COP影响细胞表面模式识别受体Dectin-1蛋白表达的变化有关。
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