病理性瘢痕中神经生长因子分布及特点的初步研究

来源 :泸州医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:njuchen1986
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目的:神经生长因子(nerve growth factor, NGF)作为最早被发现的神经肽之一,除了在神经系统疾病和修复再生中的重要作用外,NGF在病理性瘢痕中的作用正引起人们的关注。有研究发现NGF在增生性瘢痕中有较强表达,但在瘢痕疙瘩和萎缩性瘢痕中NGF密度以及NGF在病理性瘢痕中如何分布的未见报道。本实验拟通过对病理性瘢痕中NGF的免疫组化测定,探讨NGF在病理性瘢痕中的分布特点及可能的作用机制。方法:收集临床病理性瘢痕切除手术后标本36例,分为A.B.C三组:A瘢痕疙瘩,B增生性瘢痕,C萎缩性瘢痕。另取正常皮肤标本12例作为对照。将所取标本于10%的中性福尔马林中固定12h后,常规梯度酒精脱水,浸蜡包埋切片,分别做苏木精-伊红(HE)染色和免疫组织化学染色。NGF免疫组化染色阳性信号为棕黄色颗粒。NGF图像分析方法:①在400倍显微镜下分别观察各组表皮和真皮层中呈棕黄色的NGF阳性颗粒个数,并进行计数。每张切片观察5个视野取其均数进行比较。②利用Image-Pro Plus6.0图像分析系统,将NGF的表达强度用IOD值表示,每张切片表皮和真皮各取五个视野,分别测定每个视野的IOD值,取其平均值作为该标本表皮和真皮的IOD值,分别进行比较。结果:一HE染色光镜下组织形态:①正常皮肤组表皮透明层与角质层相对较厚;真皮乳头突出明显,乳突数目较多;网织层见成纤维细胞附着,核小,着色深,细胞质少,数目较少。②瘢痕疙瘩组表皮萎缩,基底层、棘层细胞胞体大,层数增加,相对层数较多;颗粒层、透明层与角质层仅见较薄的嗜酸性染色层,无法区分;真皮乳头可见,乳突数目少,低平;网织层厚,致密,见粗大的胶原,染色深,排列紊乱,有玻璃样变性,并可见血管、淋巴管,毛细血管闭锁;成纤维细胞两层均见,数目多。③增生性瘢痕组表皮基底层和棘层细胞相对层数较多,其细胞间连接较正常皮肤显得松散;透明层与角质层变薄明显;真皮乳头突出度较正常皮肤低矮,较平,数目较正常皮肤减少;网织层较厚,较致密,并可见血管、淋巴管,毛细血管扩张;成纤维细胞两层均见,数目多。④萎缩性瘢痕表皮矮柱状的基底层细胞和真皮相连接,附着于基底膜,其相对层数相对增生性瘢痕较少;其细胞间连接较正常皮肤显得松散。颗粒层细胞呈较扁的梭形,较正常皮肤明显变薄;透明层与角质层变薄明显。真皮乳头层较疏松,染色较淡,其下为网织层,较增生性瘢痕和瘢痕疙瘩薄,较致密,见粗大的胶原,染色深,较不规则,并可见毛细血管闭锁。二NGF免疫组画染色图像分析:1各病理性瘢痕组表皮NGF阳性颗粒数、NGF平均光密度和积分光密度明显高于正常皮肤组,相比较有统计学意义(P<0.01)。萎缩性瘢痕组表皮NGF阳性颗粒数、NGF平均光密度和积分光密度明显少于瘢痕疙瘩组和增生性瘢痕组,相比较有统计学意义(P<0.01)。瘢痕疙瘩组表皮NGF平均光密度和NGF积分光密度与增生性瘢痕组比较无统计学意义(P>0.05)。2各病理性瘢痕组真皮NGF阳性颗粒数、NGF平均光密度和积分光密度明显高于正常皮肤组,相比较有统计学意义(P<0.01)。萎缩性瘢痕组真皮NGF阳性颗粒数、NGF平均光密度和积分光密度明显低于瘢痕疙瘩组和增生性瘢痕组,两者比较有统计学意义(P<0.01)。瘢痕疙瘩组真皮NGF平均光密度和NGF积分光密度与增生性瘢痕组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:1被染成棕色的NGF阳性颗粒物质存在于正常皮肤及病理性瘢痕的表皮和真皮层,各组表皮NGF阳性颗粒数较真皮层多。2病理性瘢痕中NGF阳性颗粒分布广、密度高、着色浓,以表皮NGF阳性细颗粒分布最多,真皮成纤维细胞密集处NGF阳性细颗粒分布也较多。瘢痕疙瘩组表皮和增生性瘢痕组表皮NGF阳性颗粒数最多。3萎缩性瘢痕NGF阳性细颗粒较瘢痕疙瘩和增生性瘢痕少,瘢痕疙瘩组和增生性瘢痕组NGF阳性颗粒数之间无统计学差异。
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