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目的:探讨补阳还五汤及其有效部位生物碱、苷对凝血酶诱导的血管内皮细胞抗血栓性改变及PKC活化的影响。方法:以凝血酶（10u/ml）作用于培养的ECV-304细胞,同时加入药物,24h后以比色法测定细胞活力及培养上清液中LDH活性、ELISA法测定上清液tPA和PAI-1含量,SABC免疫细胞化学法测定细胞E-selectin、CD31、PKCα的表达,RT-PCR法测定细胞TF、TFPI、TM mRNA表达。结果:①凝血酶作用ECV-304后,可使细胞活力下降（P＜0.01）,培养液中LDH活性升高（P＜0.05）,tPA释放增加（P＜0.01）,E-selectin、CD31表达增强（P＜0.05）,TF、TFPI mRNA表达增强（P＜0.05）,而PAI-1释放及TM mRNA表达无显著性变化（P＞0.05）;PKCα表达增强（P＜0.05）。②补阳还五汤及生物碱、苷对凝血酶诱导的ECV-304活力降低及LDH漏出增加无显著影响。③补阳还五汤可抑制凝血酶诱导的tPA释放增加（P＜0.01）,生物碱对tPA分泌增加无显著影响（P＞0.05）;苷（1.25mg/ml）可使凝血酶诱导的tPA分泌增加（P＜0.05）;原方、生物碱和苷均可抑制ECV-304分泌PAI-1（P＜0.05）。④原方、生物碱和苷均可抑制凝血酶诱导的TF mRNA表达增强;生物碱（0.5、1mg/ml）可抑制TFPI表达（P＜0.05）;各药对TM mRNA表达无显著影响。⑤原方可抑制凝血酶诱导的E-selectin的表达（P＜0.05）,原方、生物碱和苷均可抑制凝血酶诱导的CD31的表达（P＜0.05）。⑥原方、生物碱和苷均可抑制凝血酶诱导的ECV-304细胞PKCα表达的增强（P＜0.01）。⑦PKC激活剂PMA刺激ECV-304细胞后,PKCα被激活（P＜0.01）;PKC抑制剂H7作用于PMA刺激的ECV-304细胞后,PKCα表达增强不明显,PAR-1受体抑制剂CATG作用于凝血酶刺激的ECV-304细胞后,PKCα表达显著抑制（P＜0.05）。结论:凝血酶对ECV-304具有损伤作用,可诱导内皮细胞抗血栓性发生变化。补阳还五汤原方、生物碱和苷对凝血酶诱导的血管内皮细胞抗凝、纤溶功能和血小板活化的改变具有调节作用,使血管内皮细胞的抗凝、纤溶作用趋于正常,抑制血小板的活化,其作用可能主要是通过抑制凝血酶诱导的PKCα的激活而介导的。生物碱和苷类有效部位可能为该方抗血栓作用的药效物质基础。