超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）是一类生物体内广泛存在的抗氧化酶,其生物学功能是清除生物体内因自身有氧代谢所产生的超氧自由基,从而保护细胞免受自由基的破坏。SOD可以特异性催化超氧阴离子产生歧化反应,将O₂^-催化歧化为H₂O₂和O₂。荧光假单胞菌GcM5-1A是松材线虫携带的一种伴生细菌,已有研究表明该细菌在松萎蔫病的病理进程中与松材线虫发挥着协同作用。本研究利用PCR技术,从荧光假单胞菌GcM5-1A的基因组中克隆了编码SOD的完整开放阅读框（ORF）,序列分析结果表明,该ORF全长654 bp,编码217个氨基酸。将SOD基因与表达载体pET-15b连接,构建pET-15b-SOD重组表达载体。将重组表达载体pE-15b-SOD转化大肠杆菌BL21（DE3）,构建了工程菌株。扩大培养后的工程菌通过IPTG诱导表达,经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析可知,重组SOD在大肠杆菌BL21中表现出了较高的表达效率,相对分子量约为28 kDa,主要以包涵体的形式存在。包涵体经尿素溶液溶解,稀释法复性后,复性SOD经Ni²⁺树脂亲和层析,得到可溶性的纯化超氧化物歧化酶蛋白。对所得的重组SOD蛋白进行酶活测定,并分析研究其在不同温度、不同pH值条件下的活性。结果表明,纯化的重组SOD最适温度是50°C,最适pH是8.0。该酶有较好的热稳定性,在中性及弱碱性条件下相对稳定,表达SOD的大肠杆菌能明显提高其对百草枯的耐受性。本研究克隆了松材线虫携带的一株荧光假单胞菌SOD基因,建立了重组SOD的制备方法并对其理化性质进行了研究,研究结果为深入了解松材线虫伴生细菌在松萎蔫病中的作用机制打下了基础,也为SOD的开发利用提供了参考。