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目的:研究不同发育阶段皮肤及其附属结构的抗原表达,以及细胞分化对皮肤及其附属结构损伤的修复作用。 方法:取不同发育阶段的胎儿和成人皮肤,用免疫组织化学法检测皮肤及其附属结构的抗原表达。体外分离培养人成体MSCs和SGCs,检测MSCs和SGCs的抗原表达、以及MSCs的分化能力;分别用BrdU或DAPI标记MSCs;将融合的SGCs(2～4×10~5),经47℃高温处理造成体外热损伤休克模型,再加入标记的1～2×10~5MSCs共同培养,7d后,检测MSCs的表型、表型转化率和MSCs表型转化过程中的信号机制,以及不同因素对MSCs表型转化的影响;将培养并标记的大鼠MSCs经静脉输注到全层皮肤切割伤的同种大鼠体内,分别在输注后3d、14d和28d检测皮肤和股骨部位的标记细胞和这些细胞的表型改变。包皮皮片去除脂肪后,用蛋白水解酶消化分离表皮,分离的表皮片用Ⅳ型胶原反复粘贴并冲洗以去除表皮干细胞。处理后的表皮片用DAPI标记后移植到全层皮肤切割伤的BALB/c裸鼠,并局部外用细胞生长因子,7d后用免疫组织化学法和流式细胞仪法检测移植后存活表皮细胞的表型改变。 结果:汗腺表达CK7、CK8、CK14、CK18、CK19和CEA,毛囊表达CK7、CK14和CK19,皮脂腺表达CK8和CK14,皮肤基底层表达CK19和CK14,角质层表达CK10。MSCs和SGCs均呈克隆样生长;MSCs表达CD29、CD44、CD71、CD105和CD166,不表达造血干细胞标志CD34和CD45,以及汗腺标志CK19和CEA,加入诱导培养基后MSCs可以向骨和脂肪细胞转化;BrdU或DAPI均标记MSCs的细胞核,BrdU标记率为74%,DAPI可达90%以上;培养的SGCs表达CK7、CK8、CK18、CK19和CEA;SGCs经高温损伤后,大多数细胞的细胞间连接消失;MSCs和损伤的SGCs共培养7d后,部分MSCs表达CK19/CEA汗腺细胞标志;EGF和损伤微环境促进MSCs向SGCs表型转化,而PD98059抑制这种表型转化,ERK和pERK