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心肌肥厚是心脏对多种疾病包括高血压、机械压力负荷、心肌梗塞、心律失常、内分泌机能紊乱以及心肌收缩蛋白基因突变而产生的适应性病理反应。在疾病早期,因心脏作功增加可引起代偿性心肌肥厚反应。持续性的心肌肥厚能够引起扩张性心肌病、心律失常、心力衰竭甚至猝死。心肌肥厚是引起心血管疾病发病率和病死率的独立危险因素。研究发现在心肌肥厚时左心室重量普遍增高,心血管事件发生率是无心肌肥厚者的2-4倍。心肌肥厚不仅是一个病理生理过程,而更是一个影响其短期和长期预后的失代偿性变化。它的不可逆性进展可以直接导致心力衰竭。目前临床上用于治疗心肌肥厚的治疗药物主要有血管紧张素转化酶抑制剂、血管紧张素受体拮抗剂和钙离子通道阻滞剂,但皆因存在不同程度的副作用而使其临床应用受到一定限制。而心肌肥厚的治疗是一个长期的过程,因此寻找一些疗效好而毒副作用低的药物显得十分必要。丹参酮ⅡA是中药丹参的主要脂溶性成分。目前已发现丹参酮ⅡA可以减轻、逆转高血压左心室肥厚,但其具体作用机制尚未阐明。本研究拟在腹主动脉缩窄的高血压大鼠上构建心肌肥厚模型,将丹参酮ⅡA与经典的抗心肌肥厚药物血管紧张素1型受体拮抗剂――缬沙坦比较,以探讨丹参酮ⅡA逆转心肌肥厚的分子生物学机制。第一部分丹参酮ⅡA对腹主动脉缩窄高血压大鼠心肌肥厚超声影像学及病理形态学的影响目的:研究丹参酮ⅡA对腹主动脉缩窄术后大鼠左室心肌肥厚的作用。方法:40只健康SD大鼠,行腹主动脉缩窄术建立高血压左室心肌肥厚模型,另取8只大鼠行假手术。术后4周将手术大鼠随机分为心肌肥厚组、丹参酮低剂量组(10mg/Kg/d腹腔注射)、丹参酮高剂量组(20mg/Kg/d腹腔注射)及缬沙坦组(10mg/Kg/d灌胃)。用药8周后通过超声心动图测定左室后壁、室间隔的厚度及左室射血分数(EF);取左心室组织检测左心室质量指数(left ventricular mass index,LVMI)、病理切片HE染色测量心肌纤维直径(myocardial fiber dimension,MFD)。结果:1.心肌肥厚组、丹参酮组(高、低剂量)的血压显著高于假手术组及缬沙坦组(p﹤0.01),丹参酮高、低剂量组及心肌肥厚组之间无统计学差异(p﹥0.05),缬沙坦组的血压值降至正常、但仍明显高于假手术组(p﹤0.05)。2.丹参酮高、低剂量组和缬沙坦组的室间隔厚度均高于假手术组(p﹤0.05),显著低于心肌肥厚组(p﹤0.01);丹参酮两组的室间隔厚度无差异(p﹥0.05),但高于缬沙坦组(p﹤0.05)。3.丹参酮低剂量、高剂量组及缬沙坦组之间左室后壁值数据没有显著性差异(P>0.05),此三组左室后壁值均明显低于心肌肥厚组(p﹤0.01),但尚未恢复至正常水平(p﹤0.05)。4.所有各组的EF值均在正常值范围(>60%),尚未表现出心功能衰竭。但心肌肥厚组的EF值小于其他各组(p﹤0.05),丹参酮组的EF也小于缬沙坦组(p﹤0.05)。5.丹参酮低剂量和高剂量组间LVMI和MFD没有显著性差异(P>0.05),缬沙坦组和丹参酮各组的LVMI、MFD均高于假手术组(p﹤0.05),显著低于心肌肥厚组(p﹤0.01);丹参酮两组的LVMI、MFD均高于缬沙坦组(p﹤0.05)。结论:丹参酮Ⅱ-A对心肌肥厚的逆转作用是非血压依从性的。丹参酮Ⅱ-A与血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂缬沙坦均可阻止、逆转高血压心肌肥厚的发展,但其作用弱于缬沙坦。第二部分丹参酮ⅡA对腹主动脉缩窄大鼠肥厚心肌血管紧张素受体的影响目的:通过研究丹参酮ⅡA对腹主动脉大鼠肥厚心肌血管紧张素受体及细胞内游离钙离子的影响,探讨丹参酮ⅡA逆转高血压左心室肥厚的分子生物学机制。方法:取各组大鼠的左心室组织,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫印记法(Western blotting)分别检测AT1、AT2受体mRNA和蛋白的表达水平。利用激光共聚焦显微镜测定心肌细胞内Ca2+浓度的变化。结果:1.心肌肥厚组的AT1 mRNA和蛋白的表达显著高于其他各组(p﹤0.01);丹参酮ⅡA高、低剂量组间无差异(p﹥0.05),丹参酮ⅡA组高于缬沙坦组(P﹤0.05);丹参酮ⅡA组和缬沙坦组的AT1基因表达均未降至假手术组水平(p﹤0.05)。2.缬沙坦组的AT2 mRNA和蛋白表达水平较其他各组升高(p﹤0.05),其他各组之间无统计学差异(p﹥0.05)。3.心肌肥厚组细胞内[Ca2+]i明显高于其他各组(p﹤0.01);丹参酮高剂量组与假手术组之间无统计学差异(p﹥0.05);缬沙坦组和丹参酮低剂量组仍高于假手术组和丹参酮高剂量组(p﹤0.05);丹参酮低剂量组细胞内钙浓度与缬沙坦组之间无差异(p﹥0.05)。结论:丹参酮ⅡA和缬沙坦均可通过下调AT1基因表达、阻止心肌细胞的钙离子内流发挥逆转心肌肥厚的作用,AT2有可能参与了缬沙坦降低血压、逆转心肌肥厚的作用。第三部分丹参酮IIA对腹主动脉缩窄高血压大鼠肥厚心肌一氧化氮合酶的影响目的:通过研究丹参酮ⅡA对腹主动脉缩窄大鼠肥厚心肌一氧化氮合酶的影响,探讨丹参酮ⅡA逆转高血压左心室肥厚的分子生物学机制。方法:取各组大鼠的左心室组织,利用硝酸还原酶法测定心肌组织的NO含量,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫印记法(Western blotting)分别检测eNOS的基因表达水平和蛋白激酶C(PKC)的活性。结果:1.假手术组的心肌组织NO含量明显高于其他各组(p﹤0.01);丹参酮高、低剂量组与缬沙坦组之间无统计学差异(p﹥0.05),但此三组的NO含量明显高于心肌肥厚组(p﹤0.01)。2.心肌肥厚组的eNOS mRNA和蛋白表达水平明显低于其他各组(p﹤0.01),缬沙坦组低于假手术组和丹参酮组(p﹤0.05),丹参酮高、低剂量组与假手术组之间无差异(p﹥0.05)。3.心肌肥厚组的PKC蛋白水平明显高于其他各组(p﹤0.01),缬沙坦组低于假手术组和丹参酮组(p﹤0.05),丹参酮高、低剂量组与假手术组之间无差异(p﹥0.05)。结论:心肌局部的NO/NOS系统与心肌肥厚的病理过程密切相关。丹参酮ⅡA可能通过抑制PKC的蛋白活性、促进心肌局部eNOS的基因表达和内源性NO的产生,发挥其逆转心肌肥厚的药理作用。