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背景类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis, RA)是一种以残毁性关节炎为主要特征的高度致残性自身免疫疾病。滑膜过度增生是RA典型的病理表现,主要表现为滑膜层次增多,可以由正常的1-2层增厚达到10-20层。其中主要是成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes, FLS)的持续激活、类肿瘤样增殖在滑膜增生及关节破坏中起关键作用。目前对于FLS类肿瘤样改变最核心的思想是慢性炎症可能获得一定程度的自主性,也就是说在T细胞炎症应答下调后,FLS仍能使炎症持续存在。这可能与RA-FLS既分泌FKN,又表达CX3CR1,形成FKN-CX3CR1自分泌生长促进环来促进其自身增殖有关。我科采用甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)联合环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)小剂量间歇给药治疗RA,经十余年的临床检验,取得显著疗效,大量基础及临床研究证实,该方案能更有效的抑制滑膜增生,延缓RA关节破坏,动物实验亦已证实其发挥协同治疗作用。但二者联合抑制FLS增殖是否是通过抑制RA滑膜细胞FKN-CX3CR1的表达而实现的还不清楚。本研究将明确MTX联合CTX对CIA小鼠滑膜组织FKN及CX3CR1表达的影响,探讨联合方案抑制RA滑膜细胞增殖的可能机制。目的明确MTX联合CTX能否协同降低滑膜组织FKN-CX3CR1的表达。方法选取雄性DBA1小鼠建立胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis, CIA)模型,造模成功后根据拟用药不同随机分为4组：CIA模型组、MTX组(0.9mg-kg-1·3d-1)、CTX组(24mg·kg-1·10d-1)和MTX+CTX组(联合组,MTX:0.9mg-kg-1·3d-1, CTX:24mg·kg-1·10d-1)。同时选未造模小鼠10只作为正常对照组。初次免疫3周后开始给药,治疗过程中连续对小鼠进行右后肢踝关节肿胀测量及关节炎指数(arthritis index, AI)评分。分别于给药第3、7周时处死,制成切片,进行HE及番红-固绿染色,观察病理改变。进一步通过免疫组化检测滑膜组织FKN及CX3CR1的表达,利用Image-Pro-Plus图像分析软件6.0分析系统测定累积光密度、阳性面积及平均光密度。结果1.经治疗3周后各治疗组关节肿胀、AI比CIA组改善明显,有显著性差异,部分联合组比单用药组改善更为明显,差异有统计学意义。2.治疗3周时各治疗组关节炎症病理评分与CIA组相比多无显著性差异,治疗7周时各治疗组比CIA组相比差异有统计学意义,但各治疗组差异无统计学意义。3.治疗3周时各治疗组滑膜组织FKN表达与CIA组相比差异无统计学意义。治疗7周时多数治疗组滑膜组织FKN表达与CIA组比较差异有统计学意义,联合组与部分单用药组相比差异有统计学意义。4.治疗3周时联合组滑膜组织CX3CR1表达与CIA组比较差异有统计学意义,部分单用药组与CIA组比较差异尚无统计学意义。治疗7周时联合组滑膜组织CX3CR1表达与CIA组及大部分单用药组比较差异有统计学意义。结论1.联合组较单用药组能更有效地改善CIA小鼠关节肿胀,降低AI,减轻关节炎病理；2.联合组较单用药组能更有效地抑制滑膜组织FKN及CX3CR1的表达,提示联合组能发挥更好的疗效可能通过影响FKN-CX3CR1通路来实现。