哮喘患者诱导痰嗜酸细胞阳离子蛋白及粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子的变化及意义

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目的 支气管哮喘是由嗜酸性粒细胞、肥大细胞和T淋巴细胞等多种炎性细胞及细胞因子参与的气道慢性炎症,特点是可逆性气道通气功能障碍、气道反应性增高及气道炎症。如何判断气道炎症的存在及其严重性,对哮喘早期诊断和防治均有重要意义。临床上通常根据症状、肺功能、治疗效果以及气道高反应性来间接地判断气道炎症,或通过支气管肺泡灌洗和支气管肺活检来直接评价气道炎症。前者往往不能真实地反映哮喘患者的气道炎症情况,而对于BAL和支气管粘膜活检,患者的耐受性及依从性均较低,大大限制了其应用。故目前国内外学者都在寻找无创性、特异性、易掌握的气道炎症检测方法和指标。本研究通过观察哮喘患者使用糖皮质激素治疗前后诱导痰中ECP及GM-CSF水平的变化及其与气流阻塞程度之间的关系,探讨诱导痰中炎性标志物的测定在哮喘气道炎症评估中的作用。 方法 选择轻、中度哮喘患者共20例(男11例,女9例),年龄18~64岁,第一秒钟用力呼气容积(FEV1)小于预计值80%,改善率≥15%。所有患者均使用糖皮质激素治疗4周。治疗前后进行诱导痰操作及肺功能检测。诱导痰方法:诱导前吸入喘乐宁200μg,15min后测FEV1,如>60%预计值则用超声雾化仪吸入3%高渗盐水进行全程痰液诱导。选择痰液中较为粘稠部分称重,加4倍于痰量的0.1%DTT(二硫苏糖醇)充分混匀后在37℃恒温水浴振荡中孵育15min,再用300目的尼龙网过滤后以1000r/min离心5min,吸取上清液-70℃冷冻保存待测。分别采用荧光酶标法及酶联免疫法检测诱导痰液中ECP及GM-CSF水平。采用t检验和直线相关分析进行统计学处理。结果 l、激素治疗前后痰液中ECp(卜扩L)为17.42土17.99及4.45士5,33;GM一CSF(p群而)为45.73土12.59及29.44土6.36;FEV;(Us)为2.06士0.67及2.39土0.65,均有显著性统计学差异(均为p<0.01)。 2、轻、中度哮喘之间诱导痰中ECP、GM一CSF及FEV;均有显著性统计学差异(均为p<0.01)。 3、诱导痰液中ECp与FEVI呈明显负相关(r=一0.707,p=0.001);GM一CSF与兀V,呈明显负相关(r二一0.586,p=0.007);ECP与GM一CSF呈显著正相关(r== 0.694,p=0.001)。讨论 哮喘是一种慢性气道炎症,通过获取炎症局部的体液、组织并检测细胞因子及炎症介质从而评价哮喘病情具有十分重要的意义。诱导痰方法具有无创伤、标本来源丰富、易获得、结果可重复性强的特点,与BALF及支气管肺活检有较高的符合率,而且痰液又是来源于外周气道至中央气道的分泌物,具有更为集中的细胞和生化物质成分,能够真实反映自然状态下气道分泌物的浓度。嗜酸细胞阳离子蛋白是嗜酸细胞活化的标志,是造成哮喘气道炎症的重要介质。而GM一CSF通过Eos膜表面的相应受体,直接激活嗜酸细胞、延长其寿命,并增强嗜酸细胞释放毒性嗜酸蛋白的能力。通过研究得出,轻度与中度哮喘患者诱导痰液中ECP、GM一CSF水平及FEv,具有显著性差异,使用糖皮质激素治疗后,诱导痰液中ECP及GM一CSF水平明显下降,FEV:明显改善。而且ECP、GM一CSF与FEVI呈明显负相关,ECP与GM一CSF呈明显正相关。故认为ECP、 GM一CSF的检测可作为敏感而可靠的用于监测哮喘气道炎症及评价疗效的重要指标。而进行动态诱导痰液中炎症指标的分析对于哮喘患者是否需要激素治疗及观察激素的治疗效果都具有十分重要的意义。结论 糖皮质激素可以降低哮喘患者气道内的ECP及GM一cSF水平,改善肺功能,从而达到治疗哮喘的目的。
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