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目的女性中最为常见的恶性肿瘤之一就是子宫颈癌,它严重威胁着患者的生命健康。目前临床治疗宫颈癌,主要采用手术切除,化疗,放疗等治疗方法。但患者在接受治疗后常出现术后复发,化疗、放疗效果不佳或是对药物产生强烈的副作用等情况。因此迫切需要在临床治疗中找到一些治疗效果佳,同时毒副作用低的药物。自古以来我国就一直研究和应用中草药,大量研究表明很多传统中药对肿瘤都有着很好的抑制作用,而紫草素就是其中之一。紫草素在诱导多种肿瘤细胞的凋亡中发挥着重要的作用,能显著抑制包括结直肠癌、卵巢癌、胃癌、皮肤癌以及宫颈癌在内的多种肿瘤的增殖生长,并且毒副作用较低,但目前对于宫颈癌的研究不够清楚彻底。本研究将用PI3K/AKT抑制剂LY294002联合紫草素对体外培养的宫颈癌HeLa细胞进行处理,来研究其对于宫颈癌HeLa细胞凋亡能力的作用机制。方法使用不同浓度紫草素刺激HeLa细胞,观察其形态学变化。使用CCK-8法检测紫草素对HeLa细胞活力影响。使用细胞流式仪检测紫草素对HeLa细胞周期、凋亡以及ROS的影响。使用蛋白免疫印迹法检测紫草素对HeLa细胞相关蛋白表达水平的影响。最后使用抑制剂LY294002与紫草素联用,检测二者联用对于HeLa细胞凋亡水平的影响。结果1.紫草素能显著抑制HeLa细胞增殖,且呈现出时间-浓度依赖性。受紫草素刺激的HeLa会发生形态学的变化,并且细胞活力降低。2.紫草素能导致HeLa细胞中Cyclin-D1蛋白的表达量下降,阻滞细胞停留在G0/G1期。紫草素能显著提高HeLa细胞的凋亡水平。3.紫草素刺激HeLa细胞后会提高其胞内ROS水平。4.紫草素刺激HeLa细胞后会激活AKT信号通路,引发细胞的应激反应和保护性自噬以抵抗药物作用。5.PI3K/AKT抑制剂LY294002与紫草素联用刺激HeLa细胞后,能更显著的增加HeLa细胞对紫草素的敏感性,诱导其凋亡。结论紫草素对宫颈癌HeLa细胞有显著的抑制作用。紫草素可以通过降低HeLa细胞活力,使其细胞周期停滞在G0/G1期,提高细胞内ROS水平等方式抑制HeLa细胞增殖生长,诱导其凋亡。HeLa细胞受紫草素刺激后会激活其内AKT信号通路,产生应激反应和保护性自噬。当使用PI3K/AKT抑制剂LY294002抑制AKT活性后,可以增强HeLa对紫草素的敏感性。二者联用可以更为显著的诱导HeLa细胞的凋亡。