论文部分内容阅读
本文研究了乳铁蛋白(LF)对隔离早期断奶(SEW)长白♂×梅山♀F1仔猪的营养生理效应。本研究证实SEW能显著提高仔猪的生长性能(10～15％)，常规断奶条件下，长梅二元杂交仔猪60日龄的体重在14～15kg的范围内；而采用SEW体系，仔猪的60同龄体重可达16.5～17.5kg。并发现在日粮中添加230mg／kgLF对SEW仔猪进一步提高生长性能具有重要作用(12-20％)，在SEW的基础上进一步添加LF可以使仔猪的60日龄体重达到18.5～19.5kg。同时就SEW显著提高仔猪的生长性能和LF对SEW仔猪进一步提高生长性能的作用机制进行了较为系统的研究。主要包括SEW仔猪日粮中添加不同水平LF对铁代谢相关指标(血红蛋白、总铁结合力饱和度、血清铁)、细胞因子白细胞介素1α、β和白细胞介素6以及肿瘤坏死因子α的影响；同时就LF和LFc的抗菌能力采用最低抑菌浓度(MIC值)与常用的饲用抗生素进行了比较，并利用消减杂交技术就LFc对大肠杆菌和沙门氏菌抗菌的作用的分子生物学机制进行初步探索；利用同位素示踪技术就LF和SEW对仔猪整体蛋白质周转参数的影响进行了研究。通过本研究为SEW体系的有效建立提供系统的理论基础，并为SEW体系在我国的应用提供直接的试验依据。本研究系统地分为6个试验： 试验一用48头14±3d断奶的长白♂×梅山♀仔猪，考察6个水平LF(0，30，100，300，500，1000mgLF／Kg)对仔猪生长性能的影响，同时设置抗生素对照组和低营养水平组(营养指标为正常营养组的90％)加300mg／kgLF组。以第2周仔猪体重建立的4次回归方程，R~2值达到0.9787，具有较好的拟合程度，得到乳铁蛋白在仔猪日粮中为达到最高的仔猪体重的适宜用量为200～400mg／kg。300mgLF／kg组和1000mgLF／kg组仔猪的生长性能与抗生素组没有显著差异。低营养水平组仔猪生长性能显著低于正常营养组。 试验二采用单因子试验设计，考察5个水平LF(0，50，100，200，400mg LF／Kg)对60头14±1d断奶的长白♂×梅山♀F1仔猪生长性能、养分消化率、血液铁相关指标(血清铁、血清总铁结合力和血红蛋白)以及细胞因子(IL-1α、IL-1β、IL-6、TNF-α)的影响。结果表明：通过二次曲线拟合，LF添加水平为233.78mg／kg时，仔猪的生长性能(ADG)达到最大值，拟合方程为y 0.0016x(?)0.7481x+266.45，R~2=0.9949；P＜0.01；x=233.78mg／kg，ymax=351.06。在LF添加剂量达到200和400mg／kg时，仔猪的腹泻积分极显著降低(P＜0.01)。随着LF添加剂量的增高，养分(粗蛋门质、粗脂肪、钙、磷、微量元素铜、铁、锰、锌)的消化率得到提高，并在200mgLF／kg组达到最大值。血清铁、血清总铁结合力饱和度与血红蛋白值随着LF添加剂量的增高，呈增加趋势，并在200mgLF／kg组达到最大值，200mgLF／kg组的SI、TIBC和Hb值均显著高于对照组(P＜0.05)。血清免疫学指标细胞因子的测定结果显示：添加LF的各组IL-1α、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著低于对照组，添加LF100、200和400mg／Kg组均极显著低于对照组(P＜0.01)，添加LF 50mg／kg组的IL-1β、INF-α也极显著低于对照组(P＜0.01)。通过对细胞因子水平与生长性能(ADG)的相关分析发现，二者呈明显的负相关。LF通过降低细胞因子水平，改善铁代谢状况，进而促进仔猪生长。 试验三采用单因子试验设计，考察5个水平LF(0，50，100，230，400mg LF／Kg)对60头14±1d断奶的长白♂×梅山♀F1仔猪所产仔猪生长性能的影响。结果幻:喜林乳铁上自对隔离旱期断奶仔猪背养生理效爪的研究表明，添加230mg/kgLF组仔猪的生长性能最好，14一60d ADG达到330.89/d，F/G值最低。添加230和400m留kgl一F组仔猪未发生腹泻，添加1 00mg/kg LF组仔猪的腹泻率极显著低于对照组和添加50mg/kgl了F组。以不同LF添加剂量与各试验处理组的全期AOG进行相关分析，得到的相关方程为:y二一o.0008xZ+0.3709x一、279.魂7，R“二O.8’)8;P<() .05。本试验结果进一步证实了试验二得到的SEw仔猪日粮中添加IJF的适宜剂量为230mg/kg。 试验四用LF和LFc与日种常用的饲用抗生素样品(洛克沙肿、阿维拉霉素、金霉素、阿散酸、大蒜素、哇乙醇、牛至油、盐霉素、杆菌肤锌、硫酸抗敌素、吉他霉素)在6个不同的菌株(枯草芽饱杆菌(G十)K3一2，藤黄八叠球菌(G‘)T3一2、金葡球菌(G，)J3一3、克雷伯肺炎杆菌(G+)K3一4、大肠杆菌(G一)03一3、沙门氏菌(G一)52一l)上采用两倍稀释法进行，测定样品对各种细菌的最低抑菌浓度(MIC值)。通过药敏试验判断物是否具有抗菌作用以及抗菌作用的强弱。结果表明:IJF对枯草芽饱杆菌和沙门氏菌具有明确的抗菌作用，LFc对革兰氏阴性菌大肠杆菌和沙门氏菌具有极好的抗菌性能表明乳铁蛋白在经过动物胃内胃蛋自酶的降解后形成的抗菌肤具有较强的抗菌性能。 试验Il;以试验四为基侧:，采用消减杂交(川l法)就乳铁蛋白活性肤对大肠杆菌和沙门氏菌抗菌的分子生物学机制的研究，根据比对结果确定在乳铁蛋白作用后大肠杆菌和沙门氏菌特异表达的基因。通过对在IFc作用前后大肠杆菌和沙门氏菌的基因表达的差异分析，研究该差异的特殊生物学意义。在沙门氏菌和大肠杆菌的培养基中加入!l了C后，内膜蛋白、脂蛋白、甘露糖磷酸盐鸟营酞