黄芪对代谢综合征大鼠心脏血管紧张素1-7受体Mas表达的影响目的：探讨黄芪影响代谢综合征(MS)大鼠心脏血管紧张素1-7(Ang 1-7)受体Mas蛋白的表达及其抗氧化应激的心肌保护作用。方法：160只雄性SD大鼠分为：正常对照组、MS组、MS+黄芪组和MS+黄芪H组,采用两肾一夹(2K1C)法及配合高脂饲料和饮用果糖水的方法构建MS大鼠模型。术后黄芪治疗组分别予以黄芪6.0g/kg.d和10.0g/kg.d灌胃治疗。4周后,行超声心动图及有创血流动力学检测左心室功能；放免法检测血清及心肌血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,免疫蛋白印迹法检测各组大鼠心肌Mas受体、血管紧张素转化酶(ACE)和ACE2的表达。结果：与正常对照组比较,MS组、MS+黄芪组和MS+黄芪H组大鼠收缩压、舒张压、体质量、空腹血糖、空腹胰岛素水平、甘油三酯、血清游离脂肪酸以及血浆Ang Ⅱ水平明显升高(P<0.05)；心肌SOD活性下降(106.34±16.07,141.06±23.20,143.21±25.67比174.02±20.52 U/mg,均P<0.05)；心肌MDA水平升高(30.37±7.43,22.43±5.25,29.27±5.25比17.56±2.49μmol/mg,均P<0.05)。与MS组比较,MS+黄芪组和MS+黄芪H组血浆Ang Ⅱ水平和心肌MDA水平降低(P=0.001和0.017)；心肌SOD活性升高(P=0.006)。血流动力学参数结果显示：MS+黄芪组和MS+黄芪H组大鼠左心室内压最大收缩和舒张变化速率较MS组升高(P=0.037和0.033)。与对照组比较,MS组心肌组织中ACE表达升高,而ACE2和Mas受体的表达降低(P<0.05)；与MS组比较,MS+黄芪组和MS+黄芪H组心肌组织中ACE表达降低,而ACE2和Mas受体的表达升高(均P<0.05)。结论：黄芪可以提高心肌组织ACE2、Mas的表达,降低ACE表达,改善心脏局部ACE、Mas的水平,从而对损伤的心肌细胞起保护作用；采用2K1C结合高脂饮食,并配合果糖水诱导可建造以高血压为主的MS大鼠模型。黄芪甲苷经eNOS/NO/cGMP通路改善代谢综合征大鼠左室舒张功能不全目的：代谢综合征(MS)是心力衰竭的主要危险因素,最初表现为舒张功能不全。在本研究中,我们将探讨黄芪甲苷(AST)对高糖高脂饮食诱导的MS大鼠心脏保护作用及其机制。方法：采用高糖高脂饮食(HFFD)喂养24周建立大鼠MS模型。大鼠分为四组：正常对照组、MS组、MS+AST0.5组(0.5mg/kg,腹腔注射)和MS+AST2.0组(2.0mg/kg,腹腔注射)。通过有创血流动力学和无创超声心动图学检测各参数来评估左心室功能。采集左心室组织和血液样本进行生化和分子学分析。结果：HFFD诱导的大鼠显示：高甘油三脂血症、高血糖、高胰岛素血症、高血压、肥胖及左室舒张功能不全。与正常对照组相比较,MS大鼠左室心肌组织NO和SOD水平降低、MDA含量增加(P<0.05)。再给予AST治疗后,心肌MDA水平降低、NO和SOD水平提高,并呈剂量依赖性；高剂量的AST(2.0mg/kg)可以增加心肌环鸟苷酸(cGMP)生成。免疫印迹结果显示：各实验组大鼠心肌总的内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和神经元型NOS(nNOS)的表达无显著差异；与正常对照组比较,HFFD诱导的MS大鼠心肌eNOS二聚体表达降低(P<0.05)；低剂量和高剂量的AST干预均可恢复大鼠心肌eNOS二聚体表达。结论：本部分研究表明,黄芪甲苷可以改善HFFD诱导的MS大鼠代谢异常和氧化应激损伤,黄芪甲苷的抗氧化特性和左心室舒张功能的保护机制是通过eNOS/NO/cGMP通路实现的。黄芪甲苷通过增加磷酸化内皮型一氧化氮合酶改善左室舒张功能不全目的：对于舒张功能不全现在还没有特定有效的治疗,主要原因是因为人们对这类疾病发病机制的了解相对缺乏。有研究表明,舒张功能不全与NOS解偶联、心脏氧化应激以及肌球蛋白结合蛋白C(MyBP-C)谷胱甘肽化相关。AST可以提高eNOS活性、清除活性氧自由基和NO的生成。我们假设AST可以改善因eNOS的磷酸化水平降低导致的DOCA-盐敏性高血压小鼠左室舒张功能不全。方法：我们采用醋酸去氧皮质酮(DOCA)盐敏性高血压小鼠模型。研究对象共分四组：假手术组(SHAM)和DOCA接受等量无菌水安慰治疗；SHAM+AST和DOCA+AST给予AST0.02mg/kg/day腹腔内注射治疗7天。应用超声心动图和IonOptix对整体机单心肌细胞的舒张功能进行评估。免疫印迹法测定eNOS单体、二聚体和磷酸化的表达。高效液相色谱法(HPLC)来分析心肌超氧化物阴离子(ROS)和生物蝶呤(BH4/BH2)水平。结果：黄芪甲苷可以逆转DOCA-盐敏性高血压小鼠舒张功能不全(E’/A’：SHAM vs. DOCA 1.27±0.13 vs.0.62±0.07 p<0.001; DOCA vs. DOCA+ASI 0.62±0.07 vs.1.27±0.29 p=0.002. E/E’:SHAM vs. DOCA 23.90±4.58 vs.38.83±4.37 p=0.001; DOCA vs. DOCA+ASI 23.90±4.58 vs.25.28±3.40 p=0.001)。黄芪甲苷能提高高血压小鼠心肌组织NO生成和降低ROS的产生(2HO-ET:DOCA vs. DOCA+ASI 0.36±0.19 umol/mg vs.0.20±0.05umol/mg p=0.049;亚硝酸盐/硝酸盐含量：DOCA vs. DOCA+ASI 2.58±0.49 mmol/mg vs.3.33±0.30 mmol/mg p=0.04).与假手术对照组比较高血压小鼠eNOS二聚体、eNOS-S1177和eNOS-T495的表达明显降低：与未治疗组比较,黄芪甲苷可以增加高血压小鼠心肌eNOS-S1177的表达(p=0.026),但对eNOS-T495的表达却无影响。在给予黄芪甲苷治疗后MyBP-C谷胱甘肽化表达增加(p=0.046).结论：AST可以逆转DOCA-盐敏性小鼠因eNOS二聚化与磷酸化水平的降低导致的左室舒张功能不全。黄芪甲苷用过抗氧化特性作用于心肌MyBP-C谷胱甘肽化、eNOS磷酸化及二聚化效应的改变进而改善心脏舒张功能。黄芪甲苷对高血压性心脏病大鼠室性心律失常及心功能作用机制的初步研究目的：Ca2+超载被认为是触发活动的基础,钠钙交换体(NCX)钙调蛋白激酶(CAMKⅡ)涉及Ca2+循环,并参与心力衰竭所致心律失常的发生。因此,在这部分研究中我们检测胞浆和线粒体钙离子流是否导致心肌病早后除极EADs的发生,并验证黄芪甲昔是否可通过影响钙调节来改善EADs的发生。方法：方法：建立非缺血性心肌病模型,雄性10周龄C57BL/6小鼠,单侧肾切除术后,植入DOCA药片并饮用1.05%的盐水。超声心动图评价心功能；遥测心电信号记录监测心律失常的发生；分离左室心肌细胞,记录动作电位(APs)、钾和L型钙电流；使用Fluo4-AM和Rhod-2荧光成像法测定心肌细胞胞浆和线粒体钙离子的变化；激光共聚焦显微镜检测线粒体ROS水平结果：DOCA-盐敏性高血压小鼠在左肾切除术后6周心脏收缩功能的降低,DOCA组平均EF%值为43.91±6.85%,明显低于SHAM组55.57±4.48%以及SAHM+AST组55.38±5.24%；动作电位记录结果显示DOCA组小鼠单个左室肌细胞发生早后除极(EADs)的比率占75%,明显高于SHAM组的17%的比例,动作电位复极至90%的时间(ADP90)比SHAM组明显延长(242.33±43.2ms vs.83.36±21.12ms,P<0.05)；给予心肌细胞黄芪甲苷干预后,在最初的30秒内,SHAM和DOCA组心肌细胞APD90明显延长,在作用3-5明显缩短(P<0.05)；DOCA组心肌细胞L型Ca2+电流去极化峰值幅度较SHAM组增大(P<0.05)；DOCA组左室心肌细胞K+峰值电流和稳态电流均较对照组降低(P<0.05); DOCA组小鼠左室心肌细胞胞浆Ca2+峰值幅度(F/Fo)明显降低了33%(2.56±0.38 vs.3.82±0.35,P<0.05),90%的达峰时间和衰减时间各组间无明显差异,在细胞内给予黄芪甲苷作用后,钙瞬变峰值幅度(F/F0)均较干预前增加2倍；DOCA组小鼠心肌细胞线粒体内ROS水平与对照组相比较明显增加,黄芪甲苷干预后,DOCA+AST组线粒体ROS水平较DOCA组降低(P<0.05)。DOCA-盐敏性高血压小鼠在术后2周及6周时NCX1的表达水平均降低(P<0.05)。结论：DOCA-盐敏性高血压小鼠持续血压升高导致非缺性心肌病自发性室性心律失常的发生。钙调节对心肌病早后除极起关键作用,黄芪甲苷能通过增加钙瞬变以及降低线粒体内ROS的作用来改善心肌病心功能障碍及心律失常。