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研究目的本实验以慢性不可预知温和应激（Chronic Unpredictable Mild Stress,CUMS）方法复制肝郁脾虚型抑郁症模型,结合核酸及蛋白的转录、表达等方面检测结果,在生理、组织、细胞及分子水平证实肝郁脾虚型抑郁症与5-羟色胺1A(5-HT1A)受体蛋白、双孔钾离子（TREK-1）通道及自噬的相关性,阐明逍遥散是否可以影响5-HT1A受体,再经TREK-1通道抑制自噬反应、减少神经元凋亡,进而研究逍遥散治疗肝郁脾虚型抑郁症的潜在作用机制。研究方法1.理论研究:开展相关文献调研,了解抑郁症的中医病因病机、中医证型分类、西医发病机制、逍遥散治疗抑郁症的研究进展,为本论文的实验研究提供充足的理论依据。2.实验研究:选取SPF级别雄性SD大鼠40只,分成正常组、模型组、逍遥散组及氟西汀组。采用CUMS造模方法复制肝郁脾虚型抑郁症模型,造模为期7周。运用大鼠一般生理指标、糖水偏好实验及旷场实验评价模型是否构建成功及逍遥散的功效。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测分析中医名方逍遥散对大鼠海马区TREK-1通道及自噬标记蛋白Beclin-1、LC3等基因转录的干预作用。用蛋白印迹法（Western-blot）检测逍遥散对5-HT1A受体、Beclin-1、LC3的蛋白表达的调控作用。用DNA断裂原位末端标记法（TUNEL）染色技术测定逍遥散对大鼠海马区神经元凋亡的改善作用。实验结果1.在用CUMS造模法成功复制肝郁脾虚型抑郁症模型后,大鼠出现了毛发凌乱枯黄、食欲降低、体重增长减缓、独处活动减少及大便不成形。旷场实验中,大鼠移动的总路程、中央停留时间降低,休息时间延长;糖水实验中糖水偏好率降低,上述证据表明CUMS方法成功复制肝郁脾虚型抑郁症模型,而逍遥散和氟西汀对上述病理表现均有不同程度的改善作用。2.RT-qPCR结果显示:与正常组比较,模型组、逍遥散组及氟西汀组的TREK-1通道、Beclin-1及LC3转录水平皆升高且具有显著差异（P<0.01）;与模型组比较,逍遥散组及氟西汀组的TREK-1通道、Beclin-1及LC3转录水平降低（P<0.01;P<0.05）。3.Western-blot结果显示:与正常组比较,模型组、逍遥散组及氟西汀组Beclin-1及LC3蛋白的相对灰度值明显升高,而5-HT1A受体蛋白的相对灰度值降低（P<0.01;P<0.05）;与模型组比较,逍遥散组及氟西汀组可降低大鼠的Beclin-1及LC3蛋白表达（P<0.01;P<0.05）,而5-HT1A受体蛋白的相对灰度值明显升高（P<0.01）。相关性分析显示,TREK-1通道与Beclin-1、LC3呈正相关（P<0.01）,而与5-HT1A受体呈负相关（P<0.01）。4.TUNEL结果显示:与正常组比较,模型组、逍遥散组及氟西汀组凋亡的神经细胞百分率增多（P<0.01;P<0.05）;与模型组对比,逍遥散组凋亡的神经细胞百分率明显减少（P<0.01）,优于氟西汀组。结论1.文献调研发现抑郁症发病中肝郁脾虚型占据非常重要地位。2.肝郁脾虚型抑郁症的发生可能与5-HT1A受体蛋白经TREK-1通道影响自噬,调控自噬标志蛋白Beclin-1及LC3,最后导致神经元凋亡有关。3.逍遥散可以调节5-HT1A受体蛋白,5-HT1A受体蛋白再经TREK-1通路影响自噬,调控自噬标记蛋白Beclin-1及LC3,减少神经元凋亡,从而治疗肝郁脾虚型抑郁症。